Amplificación - 3M Listeria MDAL96 Manual Del Usuario

4.5 Repita los pasos 4.1 a 4.4 según sea necesario para la cantidad de muestras que se deben analizar.
4.6 Cuando ya haya transferido todas las muestras, transfiera 20 µl de NC a un tubo de LS. Utilice la Herramienta para Encapuchado/
Desencapuchado del Sistema de Detección Molecular - Lisis 3M para volver a tapar el tubo de LS.
4.7 Cubra la gradilla de tubos de LS con la tapa de la gradilla e inviértala con firmeza entre 3 y 5 veces para mezclar. La suspensión debe fluir
libremente dentro del tubo.
5. Verifique que la temperatura del Bloque de Calor para el Sistema de Detección Molecular 3M sea de 100 ± 1 °C. Coloque la gradilla de tubos de
LS en el Bloque de Calor para el Sistema de Detección Molecular 3M y caliente durante 15 ± 1 minutos
debidamente con calor durante el paso de lisis del análisis pueden considerarse un posible riesgo biológico y NO deben introducirse en el Equipo
de Detección Molecular 3M.
6. Retire la gradilla de tubos de LS del bloque de calentamiento y deje que se enfríe en la Inserción del Bloque de Frío para el Sistema de Detección
Molecular 3M durante 10 ± 1 minutos
Sistema de Detección Molecular 3M.
7. Retire la gradilla de tubos de LS de la Inserción del Bloque de Frío para el Sistema de Detección Molecular 3M o la Bandeja para el Bloque de Frío
del Sistema de Detección Molecular 3M. Vuelva a colocar la tapa sobre la gradilla de tubos de LS e inviértala con firmeza entre 3 y 5 veces para
mezclar. La suspensión debe fluir libremente dentro del tubo.
8. Dé golpecitos firmes a la gradilla de tubos de lisis contra la mesa de laboratorio entre 3 y 5 veces.
9. Coloque la gradilla sobre la mesa de laboratorio. Déjela allí sin tocarla durante 5 a 10 minutos para que la resina se asiente. No mezcle ni mueva
la resina depositada en el fondo del tubo.
99-101ºC
99-101 °C
(a) Las alternativas para que los tubos de LS alcancen temperatura ambiente son incubarlos en una incubadora a 37 ± 1 °C durante 1 hora
o a temperatura ambiente durante toda la noche (de 16 a 18 horas).
(b) La alternativa de usar el calor seco durante el paso de la lisis es usar un baño María a 100 ± 1 °C. Asegúrese de que el agua cubra hasta el
nivel del líquido en los tubos de LS. Coloque la gradilla de los tubos de LS a baño María a 100 ± 1 °C y caliente durante 15 ± 1 minutos.
(c) La solución de LS puede congelarse cuando se procesan menos de 48 tubos de LS. Congelar la solución de LS no afectará la prueba. Si
observa congelamiento, deje que los tubos de LS se descongelen durante 5 minutos antes de mezclar.
AMPLIFICACIÓN
1. Se requiere un tubo de reactivo para cada muestra y el NC.
1.1 Las tiras de tubos de reactivo pueden cortarse para obtener la cantidad de tubos deseada. Seleccione la cantidad de tubos de reactivo
individuales o de tiras de 8 tubos necesaria.
1.2 Coloque los tubos de reactivo en una gradilla vacía.
1.3 Evite mover las perlas de reactivo en el fondo de los tubos.
2. Seleccione 1 tubo de Control de Reactivos (RC) y colóquelo en la gradilla.
3. Para evitar la contaminación cruzada, destape una tira de tubos de reactivo por vez y use una nueva punta de pipeta para cada paso de
transferencia.
4. Transfiera el lisato a los tubos de reactivo y al tubo de RC como se indica a continuación:
Transfiera cada lisato de muestra a un tubo de reactivo individual primero y luego el NC. Hidrate el tubo de RC al final.
ADVERTENCIA: Debe tener cuidado al pipetear la LS, ya que la transferencia de la resina puede interferir en la amplificación.
4.1 Utilice la Herramienta para Encapuchado/Desencapuchado del Sistema de Detección Molecular - Reactivo 3M™ para destapar una tira de
tubos de reactivo, una tira por vez. Deseche la tapa.
4.2 Transfiera 20 µl de lisato de muestra de la porción superior del líquido en el tubo de LS al tubo de reactivo correspondiente. Viértalo en ángulo
para evitar que se muevan las perlas. Mezcle pipeteando suavemente hacia arriba y hacia abajo 5 veces.
4.3 Repita el paso 4.2 hasta que cada lisato de muestra individual se haya agregado al correspondiente tubo de reactivo de la tira.
4.4 Cubra los tubos de reactivo con la tapa adicional provista y utilice el lado redondeado de la Herramienta para Encapuchado/Desencapuchado
del Sistema de Detección Molecular – Reactivo 3M para aplicar presión con un movimiento hacia adelante y hacia atrás para asegurarse de
que la tapa quede bien ajustada.
4.5 Repita los pasos 4.1 a 4.4 según sea necesario para la cantidad de muestras que se deben analizar.
4.6 Cuando ya haya transferido todos los lisatos de muestra, repita los pasos 4.1 a 4.4 para transferir 20 µl de lisato de NC a un tubo de reactivo.
. Retire la tapa de la gradilla durante la incubación en la Inserción del Bloque de Frío para el
(c)
0-20ºC 20-25ºC
0-20 °C 20-25 °C
3X
20-25 °C 20-25ºC
3X
8
(Español)
ES
. Las muestras que no se hayan tratado
(b)
20-25 °C 20-25ºC