3M Listeria MDAL96 Manual Del Usuario página 118

5. Varmista, että 3M Molekyläärisen testilämpölohkon pistokkeen lämpötila on 100 ±1 °C. Aseta LS-putkiteline 3M Molekyläärisen testilämpölohkon
pistokkeeseen ja kuumenna 15 ±1 minuuttia
muodostaa biologisen vaaratekijän, jolloin niitä EI saa asettaa 3M Molekylääriseen testi-instrumenttiin.
6. Ota LS-putkiteline pois lämmityslohkosta ja anna jäähtyä 3M Molekyläärisen testijäähdytyslohkon pistokkeessa 10 ±1 minuuttia
kansi inkuboinnin aikana 3M Molekyläärisen testijäähdytyslohkon pistokkeessa.
7. Ota LS-putkiteline 3M Molekyläärisen testijäähdytyslohkon pistokkeesta / 3M Molekyläärisen testijäähdytyslohkon alustasta. Aseta LS-
putkitelineen kansi takaisin paikoilleen ja sekoita suspensio kääntämällä telinettä napakasti ylösalaisin 3–5 kertaa. Suspension on juostava
vapaasti putken sisässä.
8. Napauta lyysiputkitelinettä napakasti laboratoriotyötasoon 3–5 kertaa.
9. Aseta teline laboratoriotyötasolle. Jätä se tasolle 5–10 minuutiksi, jotta hartsi asettuu. Älä sekoita tai liikuta putken pohjalla olevaa hartsia.
99-101ºC
99-101 °C
(a) LS-putket voi vaihtoehtoisesti tasata huoneenlämpötilaan inkuboimalla putkia 37 ±1 °C:n inkubaattorissa 1 tunnin ajan tai pitämällä niitä
huoneenlämpötilassa yön yli (16–18 tuntia).
(b) Lyysivaiheessa voi kuivakuumennuksen sijaan käyttää vaihtoehtoisesti 100 ±1 °C:n vesihaudetta. Varmista, että vettä on riittävä määrä ja että
se peittää LS-putkien nestetason. Aseta LS-putkiteline 100 ±1 °C:n vesihauteeseen ja kuumenna 15 ±1 minuuttia.
(c) LS-liuos saattaa jäätyä, kun käsiteltäviä LS-putkia on alle 48. LS-liuoksen jäätyminen ei vaikuta testiin. Jos huomaat liuoksen jäätyneen, anna
LS-putkien sulaa 5 minuuttia ennen sekoittamista.
MONISTAMINEN
1. Kullekin näytteelle ja negatiiviselle kontrollille (NC) tarvitaan yksi näytereagenssiputki.
1.1 Reagenssiputkiliuskat voidaan leikata haluttuun putkimäärään. Valitse tarvitsemasi yksittäisten reagenssiputkien tai 8 putken liuskojen määrä.
1.2 Aseta reagenssiputket tyhjään telineeseen.
1.3 Vältä liikuttamasta reagenssipellettejä putkien pohjalta.
2. Valitse 1 reagenssin valvontaputki (RC) ja aseta telineeseen.
3. Estä ristikontaminaatio poistamalla suojus yhdestä reagenssiputkiliuskasta kerrallaan ja käyttämällä jokaiseen siirtoon uutta pipetinkärkeä.
4. Siirrä lysaatti reagenssiputkiin ja RC-putkeen noudattamalla seuraavia ohjeita:
Siirrä ensin jokainen näytelysaatti yksittäisiin reagenssiputkiin ja sen jälkeen negatiivinen kontrolli (NC). Kastele RC-putki viimeiseksi.
VAROITUS: Noudata lysaatin pipetoinnissa varovaisuutta, sillä hartsin jäänteet voivat haitata monistusta.
4.1 Käytä 3M™ Molekyläärisen testin cap/decap-työkalua - Reagenssi reagenssiputkien suojuksen avaamiseen. Avaa yksi reagenssiputkiliuska
kerrallaan. Heitä suojus pois.
4.2 Siirrä 20 µl näytelysaattia LS-putkessa olevan nesteen yläosasta vastaavaan reagenssiputkeen. Annostele kulmassa, jotta et liikuta pellettejä.
Sekoita pipetoimalla varovasti ylös ja alas 5 kertaa.
4.3 Toista vaihe 4.2, kunnes yksittäinen näytelysaatti on lisätty vastaavaan reagenssiputkeen liuskassa.
4.4 Peitä reagenssiputket mukana toimitetulla lisäsuojuksella ja varmista, että se on tiukasti paikoillaan painamalla sitä 3M Molekyläärisen testin
cap/decap-työkalun - Reagenssi pyöristetyllä puolella eteen- ja taaksepäin suuntautuvalla liikkeellä.
4.5 Toista tarvittaessa vaiheet 4.1–4.4 testattavien näytteiden määrän mukaan.
4.6 Kun olet siirtänyt kaikki näytelysaatit, siirrä 20 µl negatiivista kontrollilysaattia reagenssiputkeen toistamalla vaiheet 4.1–4.4.
4.7 Siirrä 20 µl negatiivista kontrollilysaattia RC-putkeen. Annostele kulmassa, jotta et liikuta pellettejä. Sekoita pipetoimalla varovasti ylös ja
alas 5 kertaa.
. Jos näytteitä ei ole asianmukaisesti lämpökäsitelty testin lyysivaiheen aikana, ne saattavat
(b)
0-20ºC 20-25ºC
0-20 °C 20-25 °C
8
FI (Suomenkielinen)
3X
20-25ºC
20-25 °C
3X
20-25 °C 20-25ºC
. Poista telineen
(c)