3M Listeria MDAL96 Manual Del Usuario página 237

5. 3M 분자 검출 히팅 블록 인서트의 온도가 100±1°C인지 확인합니다. LS 튜브의 랙을 3M 분자 검출 히팅 블록 인서트에
놓고 15±1분 동안 가열합니다
간주되어 3M 분자 검출기에 절대로 삽입하지 마십시오.
6. 히팅 블록에서 LS 튜브의 랙을 제거하고 10±1분 동안 3M 분자 검출 냉각 블록 인서트를 냉각시킵니다
검출 냉각 블록 인서트의 랙 뚜껑을 엽니다.
7. 3M 분자 검출 냉각 블록 인서트/3M 분자 검출 냉각 블록 트레이 시스템에서 LS 튜브의 랙을 제거합니다. LS 튜브의 랙에
뚜껑을 다시 덮고 3-5번 강하게 뒤집어 혼합합니다. 서스펜션은 튜브 내부에서 자유롭게 흘러야 합니다.
8. 실험실 벤치에 3-5번 lysis 튜브 랙을 단단히 두드립니다.
9. 랙을 실험실 벤치에 놓습니다. 5-10분 동안 안정된 상태로 두어 수지가 가라앉도록 합니다. 튜브 맨 아래 수지를 섞거나
휘젓지 마십시오.
99-101ºC
(a) 실온에서 LS 튜브를 평형 유지하는 대안은 37±1°C 인큐베이터에서 1 시간 또는 실온에서 하룻밤 (16-18 시간 ) 동안 LS
튜브를 배양하는 것입니다 .
(b) 용해 단계에서 건식 가열을 사용하는 대안은 100±1°C 에서 수조를 사용하는 것입니다 . LS 튜브에서 액체 수준을 유지할
수 있도록 충분한 물을 사용해야 합니다 . LS 튜브의 랙을 100±1°C 의 수조에 넣고 15±1 분 동안 가열합니다 .
(c) 48 LS 튜브보다 적게 처리하면 LS 용액이 동결될 수 있습니다 . LS 용액이 동결되어도 시험에는 영향을 주지 않습니다 .
동결된 경우 , 혼합하기 전에 LS 튜브를 5 분 동안 녹입니다 .
증폭
1. 각 시료와 NC별로 하나의 Reagent 튜브가 필요합니다.
1.1 Reagent 튜브 스트립은 원하는 튜브 번호로 나누어 지게 됩니다. 개별 Reagent 튜브 또는 필요한 8-튜브 스트립의 번호를
선택합니다.
1.2 Reagent 튜브를 빈 랙에 놓습니다.
1.3 튜브 맨 아래 시약 알갱이를 휘젓지 마십시오.
2. 1 RC(Reagent 컨트롤) 튜브를 선택하고 랙에 놓습니다.
3. 교차 오염을 방지하기 위해 한 번에 Reagent 튜브 스트립 1개의 마개를 빼내고 각 분주 단계마다 새 피펫을 사용합니다.
4. 용해물을 Reagent 튜브 및 RC 튜브로 옮기는 방법은 다음과 같습니다.
각 샘플 용해물을 개별 Reagent 튜브로 먼저 옮긴 뒤 NC를 옮기십시오. RC 튜브를 마지막에 수화시킵니다.
경고: 수지의 잔존이 증폭을 방해할 수 있으므로, LS를 피펫팅할 때 주의를 기울여야 합니다.
4.1 3M™ 분자 검출 Reagent Cap/Decap Tool을 사용하여 Reagent 튜브 캡을 엽니다 – 1 Reagent 튜브 스트립도 같이 엽니다. 캡을
버리십시오.
4.2 LS 튜브에서 윗부분 액체 중 20µL의 시료 용해물을 해당 Reagent 튜브로 분주합니다. 알갱이를 휘저어서 섞이지 않도록
기울여 붓습니다. 위아래로 가볍게 5번을 피펫팅하여 섞습니다.
4.3 개별 시료 용해물이 스트립의 해당 Reagent 튜브에 추가될 때까지 4.2단계를 반복합니다.
4.4 제공된 추가 마개로 Reagent 튜브를 덮고 3M 분자 검출 Reagent Cap/Decap Tool의 둥근 측면을 사용해 앞뒤로 압력을
가하면서 마개가 제대로 닫혔는지 확인합니다.
4.5 시험할 시료 수에 대해, 필요한 만큼 4.1-4.4단계를 반복합니다.
4.6 모든 시료 용해물이 분주되었으면, 4.1-4.4단계를 반복하여 20µL의 NC 용해물을 Reagent 튜브로 분주합니다.
4.7 20µL NC 용해물을 RC 튜브로 옮깁니다. 알갱이를 휘저어서 섞이지 않도록 기울여 붓습니다. 위아래로 가볍게 5번을
피펫팅하여 섞습니다.
. 용해 평가 단계 동안 적절하게 열처리가 되지 않은 샘플은 잠재적인 생물학적 위험으로
(b)
20-25ºC
0-20ºC
3X
20-25ºC
3X
8
KO
(한국어)
. 배양 중에 3M 분자
(c)
20-25ºC