3M Listeria MDAL96 Manual Del Usuario página 162

4.5 Повторите шаги 4.1–4.4 столько раз, сколько проб необходимо протестировать.
4.6 После переноса всех проб добавьте в пробирку с раствором для лизиса 20 мкл отрицательного контроля. Для запечатывания пробирки с раствором для
лизиса используйте инструмент «3M Молекулярная диагностика. Инструмент для запечатывания/распечатывания пробирок (Лизис)».
4.7 Закройте штатив для пробирок с раствором для лизиса крышкой и переверните штатив от 3 до 5 раз, чтобы перемешать содержимое пробирок. Суспензия
должна свободно течь по пробиркам.
5. Убедитесь в том, что температура внутреннего нагревательного блока для молекулярной диагностики 3M составляет 100 ± 1 °C. Поместите штатив для пробирок
с раствором для лизиса во внутренний нагревательный блок для молекулярной диагностики 3M и нагревайте штатив в течение 15 ± 1 мин
прошли должную тепловую обработку на этапе лизиса, могут представлять биологическую опасность. Их ЗАПРЕЩАЕТСЯ вставлять в прибор для молекулярной
диагностики 3M.
6. Извлеките штатив для пробирок с раствором для лизиса из нагревательного блока и охладите штатив в блоке «3M Молекулярная диагностика. Охладительный
блок (вставной)». Штатив должен остывать на протяжении 10 ± 1 мин
диагностика. Охладительный блок (вставной)».
7. Извлеките штатив для пробирок с раствором для лизиса из блока «3M Молекулярная диагностика. Охладительный блок (вставной)» или лотка «3M Молекулярная
диагностика. Лоток для охладительного блока». Закройте крышку штатива для пробирок с раствором для лизиса и переверните штатив от 3 до 5 раз, чтобы
перемешать содержимое пробирок. Суспензия должна свободно течь по пробиркам.
8. Резко ударьте штатив с пробирками для лизиса о лабораторный стол от 3 до 5 раз.
9. Поместите штатив на лабораторный стол. Оставьте штатив на 5–10 минут, чтобы дать смоле осесть. Не перемешивайте смолу на дне пробирок и не нарушайте
ее состояние.
99-101 °C 99-101ºC
(a) Другой способ довести пробирки с раствором для лизиса до комнатной температуры: оставить их в инкубаторе при температуре 37 ± 1 °C на 1 час или при
комнатной температуре — на ночь (16–18 часов).
(b) Вместо сухого жара на этапе лизиса можно использовать водяную баню с температурой 100 ± 1 °C. Убедитесь, что вода перекрывает уровень жидкости
в пробирках с раствором для лизиса. Поместите штатив для пробирок с раствором для лизиса на водяную баню с температурой 100 ± 1 °C и нагревайте его
в течение 15 ± 1 мин.
(c) Раствор для лизиса может замерзнуть, если обрабатывается менее 48 пробирок с раствором для лизиса. Замерзание раствора для лизиса не влияет на
результаты тестирования. Если раствор замерзнет, оставьте пробирки с раствором для лизиса на 5 минут для оттаивания перед смешиванием.
АМПЛИФИКАЦИЯ
1. На каждую обычную пробу и пробу отрицательного контроля необходимо использовать по одной пробирке с реагентом.
1.1 Для получения необходимого количества пробирок с реагентами пластинки с пробирками можно разрезать. Выберите необходимое количество отдельных
пробирок с реагентами или пластинок с 8 пробирками.
1.2 Поместите пробирки с реагентами в пустой штатив.
1.3 Не тревожьте осадок от реагентов на дне пробирок.
2. Выберите 1 пробирку для контроля реагентов (RC) и поместите ее в штатив.
3. Во избежание вторичного загрязнения распечатывать пробирки с реагентами на каждой пластинке следует по очереди, а перед каждым этапом переноса проб
необходимо менять наконечник для пипетки.
4. Перенесите лизат в пробирки с реагентами и пробирку для контроля реагентов, как описано ниже.
В первую очередь перенесите лизат всех проб в отдельные пробирки с реагентами. Затем перенесите отрицательный контроль. Гидратируйте пробирку для контроля
реагентов в последнюю очередь.
ПРЕДУПРЕЖДЕНИЕ. Необходимо соблюдать осторожность при отмеривании пипеткой раствора для лизиса, поскольку перенос смолы может повлиять на результаты
амплификации.
4.1 Распечатывайте пробирки с реагентами с помощью инструмента «3M™ Молекулярная диагностика. Инструмент для запечатывания/распечатывания пробирок
(Реагент)». Необходимо распечатывать пробирки на одной пластинке за раз. Утилизируйте колпачки.
4.2 Перенесите 20 мкл лизата пробы из верхней части пробирки с раствором для лизиса в соответствующую пробирку с реагентом. Переносить лизат в пробирку
следует под определенным углом, чтобы не поднять осадок. Перемешайте лизат в пробирке с помощью пипетки (наберите и выпустите жидкость из пипетки
5 раз).
4.3 Повторяйте шаг 4.2 до тех пор, пока лизат избранной пробы не будет перенесен в соответствующую пробирку с реагентом на пластинке.
. Снимите крышку со штатива на время инкубации в блоке «3M Молекулярная
(c)
20-25ºC
0-20 °C 0-20ºC 20-25 °C
8
3X
20-25 °C 20-25ºC
3X
20-25 °C 20-25ºC
RU
(Русский)
(b) . Пробы, которые не