3M Listeria MDAL96 Manual Del Usuario página 48

ISTRUZIONI PER L'USO
Seguire attentamente tutte le istruzioni. In caso contrario si possono ottenere risultati non precisi.
Decontaminare periodicamente i banchi di laboratorio e l'attrezzatura (pipette, strumenti per aprire e chiudere i tubi, ecc...) con una soluzione di
candeggina per uso domestico 1-5% (diluita con acqua v: v) o soluzione per la rimozione di DNA.
ARRICCHIMENTO DEL CAMPIONE
3M raccomanda l'uso di Brodo di Arricchimento Modificato per Listeria 3M (Tabella 2) o di Brodi di base Demi Fraser e Fraser (Tabella 3) per
l'arricchimento dei campioni alimentari e ambientali.
AVVERTENZA: non utilizzare Brodi di base Demi Fraser o Fraser contenenti citrato ferrico di ammonio (FAC), già presente nel brodo di base
o aggiunto, durante l'uso dell'Analisi molecolare 3M per il rilevamento della Listeria.
Alimenti
Le Tabelle 2 e 3 presentano indicazioni sull'arricchimento di campioni alimentari di 25 g a una diluizione 1:10. È responsabilità dell'utente convalidare
i protocolli di campionamento alternativi o i rapporti di diluizione per assicurare che il presente metodo di prova soddisfi i propri criteri.
• Preriscaldare il terreno di arricchimento a 37 ± 1 °C.
• Combinare asetticamente il terreno di arricchimento e il campione. Per tutti i campioni di carne e con elevato numero di particelle, si consiglia
l'utilizzo di filtri a sacco. Omogeneizzare completamente per 2 minuti utilizzando un omogeneizzatore, un miscelatore o tramite massaggio
manuale. Incubare a 37 ± 1 °C (vedere le Tabelle 2 e 3).
• Esclusivamente per i protocolli per Brodi di base Demi Fraser: se necessario, trasferire 0,1 ml dell'arricchimento primario in 10,0 ml di brodo
di base Fraser (vedere Tabella 3). Incubare a 37 ± 1 °C per 24-26 ore.
Campioni ambientali
I dispositivi di raccolta dei campioni possono essere costituiti da una spugna idratata con una soluzione neutralizzante per inibire gli effetti dei
disinfettanti. 3M consiglia l'utilizzo di una spugna di cellulosa priva di biocidi. La soluzione neutralizzante può essere il brodo neutralizzante Dey-
Engley (D/E). Si consiglia di disinfettare l'area dopo il campionamento.
AVVERTENZA: in caso di selezione di utilizzo di Tampone neutralizzante (NB) con composto aril-solfonato, come soluzione idratante per la spugna,
è necessario eseguire una diluizione 1:2 (1 parte di campione in 1 parte di brodo di arricchimento sterile) del campione ambientale arricchito prima
del test per ridurre i rischi associati al risultato falso negativo che porta al rilascio di prodotto contaminato.
La dimensione consigliata dell'area di campionamento per verificare la presenza o assenza di patogeni sulla superficie è di almeno 100 cm
10 cm o 4"x4"). In caso di campionamento con una spugna, coprire l'intera area procedendo in due direzioni (da sinistra a destra e dall'alto in basso)
o raccogliere i campioni ambientali seguendo il proprio protocollo di campionamento attuale o le linee guida
1. Preriscaldare il terreno di arricchimento a 37 ± 1 °C.
2. Combinare asetticamente il terreno di arricchimento e il campione. Omogeneizzare completamente utilizzando un omogeneizzatore, un
miscelatore o tramite massaggio manuale. Per il protocollo del Brodo di Arricchimento Modificato per Listeria 3M, omogeneizzare per
2 ± 0,2 minuti. Per i protocolli per brodo di base Demi Fraser omogeneizzare per 30 secondi. Incubare a 37 ± 1 °C (vedere le Tabelle 2 e 3).
4
IT (italiano)
2
, USDA FSIS MLG o ISO 18593
(1) (2)
(10 cm x
.
(6)