3M Listeria MDAL96 Manual Del Usuario página 125

INSTRUÇÕES DE USO
Siga todas as instruções com atenção. Caso contrário, pode haver resultados imprecisos.
Periodicamente, descontamine a bancada e os equipamentos do laboratório (pipetas, ferramentas de tampar/destampar, etc.) com uma solução de
1 a 5% (v:v em água) de água sanitária ou solução de remoção de DNA.
ENRIQUECIMENTO DE AMOSTRA
A 3M recomenda o uso de 3M Caldo para recuperação de Listeria Modificado (Tabela 2), ou Demi Fraser Caldo Base e Fraser Caldo Base (Tabela 3)
para o enriquecimento de amostras ambientais e de alimentos.
AVISO: Não utilize o Demi Fraser Caldo Base e Fraser Caldo Base contendo Citrato de Amônio Férrico (FAC), seja inserido no caldo base ou como
um suplemento adicional, ao utilizar o 3M Ensaio para Detecção Molecular de Listeria.
Alimentos
As tabelas 2 e 3 apresentam orientações para o enriquecimento de amostras de alimentos de 25 g em uma diluição de 1:10. É responsabilidade do
usuário validar protocolos de amostragem ou taxas de diluição alternativos para garantir que este método de teste atenda aos critérios do usuário.
• Pré-aqueça o meio de enriquecimento a 37 ± 1°C.
• Combine, de forma asséptica, o meio de enriquecimento e a amostra. Para amostras de todos os tipos de carne e de substância altamente
particuladas, recomenda-se o uso de sacos de filtragem. Homogeneíze completamente durante 2 minutos utilizando um digestor, um
liquidificador ou por meio de massagem manual. Incube a 37 ± 1°C (consulte as tabelas 2 e 3).
• Somente para protocolos de Demi Fraser Caldo Base: Se necessário, transfira 0,1 mL do enriquecimento primário em 10,0 mL do Fraser
Caldo Base (consulte a tabela 3). Incube a 37 ± 1°C por 24-26 horas.
Amostras ambientais
Os dispositivos de coleta de amostras podem ser uma esponja hidratada com uma solução neutralizadora para desativar os efeitos dos desinfetantes.
A 3M recomenda o uso de uma esponja de celulose livre de biocidas. A Solução neutralizadora pode ser o Caldo Neutralizador Dey-Engley (D/E).
É recomendável que a área seja desinfetada após a amostragem.
AVISO: Caso escolha utilizar tampão neutralizador (Neutralizing Buffer - NB) que contém complexos de sulfonato de arila como a solução hidratante
para a esponja, então será necessário que você execute uma diluição de 1: 2 (1 parte da amostra em 1 parte do caldo de enriquecimento estéril)
da amostra ambiental enriquecida antes de testar, para reduzir os riscos de um resultado falso-negativo que levaria à liberação de produtos
contaminados.
O tamanho recomendado da área de amostragem para verificar a presença ou ausência do agente patogênico na superfície é de pelo menos 100 cm
(10 cm x 10 cm ou 4"x4"). Ao coletar amostras com uma esponja, abranja toda a área indo em duas direções (da esquerda para a direita e de cima
para baixo) ou colete amostras ambientais seguindo seu protocolo de amostragem atual ou de acordo com as orientações FDA BAM
MLG ou ISO 18593 .
(2) (6)
1. Pré-aqueça o meio de enriquecimento a 37 ± 1°C.
2. Combine, de forma asséptica, o meio de enriquecimento e a amostra. Homogeneíze completamente utilizando um digestor, um liquidificador ou
por meio de massagem manual. Para o protocolo do 3M Caldo para Recuperação de Listeria Modificado, homogeneizar durante 2 ± 0,2 minutos.
Para o protocolo Demi-Fraser Caldo Base, homogeneizar durante 30 segundos. Incube a 37 ± 1°C (consulte as tabelas 2 e 3).
4
PT (Português)
, USDA FSIS
(1)
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