3M Listeria MDAL96 Manual Del Usuario página 173

5. 3M Moleküler Tayin Isıtma Bloğu Ek Parçası sıcaklığının 100 ± 1°C'de olduğunu doğrulayın. LS tüpleri rafını 3M Moleküler Tayin Isıtma Bloğu Ek Parçası'na yerleştirin ve
15 ± 1 dakika süreyle ısıtın . Test lizis aşaması sırasında doğru şekilde ısıl işleme tabi tutulmayan numuneler, olası bir biyolojik tehlike olarak düşünülebilir ve 3M Moleküler Tayin
(b)
Cihazı'na YERLEŞTİRİLMEMELİDİR.
6. LS tüpleri rafını ısıtma bloğundan çıkarın ve 3M Moleküler Tayin Soğutma Bloğu Ek Parçası'nda 10 ± 1 dakika boyunca soğutun
Parçası üzerinde inkübasyon sırasında raf kapağını çıkarın.
7. LS tüpü rafını, 3M Moleküler Tayin Soğutma Bloğu Ek Parçası/ 3M Moleküler Tayin Soğutma Bloğu Tepsisi sisteminden çıkarın. Kapağı LS tüpü rafına geri takın ve karıştırmak üzere
3-5 kez sert bir şekilde ters çevirin. Süspansiyon tüp içinde serbestçe akmalıdır.
8. Lizis tüp rafını laboratuvar tezgahı üzerine 3-5 kez sert bir şekilde vurun.
9. Rafı laboratuvar tezgahı üzerine koyun. Resinin çökmesine izin vermek için 5-10 dakika boyunca hiç dokunmayın. Tüpün dibindeki resini karıştırmayın veya altüst
etmeyin.
99-101ºC
(a) LS tüplerinin oda sıcaklığına gelmesi için alternatif yöntemler, LS tüplerinin 1 saat süreyle 37 ± 1°C sıcaklıktaki bir inkübatör içinde veya bir gece boyunca (16-18 saat) oda
sıcaklığında inkübe edilmesidir.
(b) Lizis aşaması için kuru ısı kullanımına alternatif olarak, 100 ± 1°C sıcaklıkta su banyosu kullanılabilir. LS tüpleri içindeki sıvı seviyesini karşılamaya yetecek kadar su
kullanıldığından emin olun. LS tüplerinin rafını 100 ± 1°C'deki su banyosu içine yerleştirin ve 15 ± 1 dakika süreyle ısıtın.
(c) 48'den az LS tüpüne işlem uygulandığında, LS tüpü solüsyonu donabilir. LS solüsyonunun donması, testinizi etkilemeyecektir. Donma gözlenirse, karıştırmadan önce LS tüplerinin
çözülmesi için 5 dakika bekleyin.
AMPLİFİKASYON
1. Her numune ve NC için bir Reaktif tüpü gereklidir.
1.1 Reaktif tüpü stripleri, istenen tüp sayısıyla sınırlanabilir. İhtiyaç duyulan sayıda ayrı Reaktif tüpü veya 8 tüplük stripler seçin.
1.2 Reaktif tüplerini boş bir rafa yerleştirin.
1.3 Tüplerin dip tarafındaki reaktif peletlerini karıştırmaktan kaçının.
2. 1 Reaktif Kontrolü (RC) tüpünü seçin ve rafa yerleştirin.
3. Çapraz kontaminasyonu önlemek için, bir seferde yalnızca bir Reaktif tüpü strip kapağını açın ve her aktarım aşaması için yeni bir pipet ucu kullanın.
4. Lizatı, aşağıda açıklandığı gibi Reaktif tüplerine ve RC tüpüne transfer edin:
İlk olarak her bir lizat numunesini ve ardından NC'yi ayrı Reaktif tüplerine aktarın. RC tüpünü en son ıslatın.
UYARI: Resin aktarımı, amplifikasyonu etkileyebileceğinden, LS'yi pipetle alırken dikkatli olun.
4.1 Bir defada bir Reaktif tüpü stripi üzerinde çalışarak, Reaktif tüplerinin kapağını sökmek için 3M™ Moleküler Tayin Kapak Takma/Kapak Sökme Aracı-Reaktif'i kullanın. Kapağı
atın.
4.2 LS tüpündeki sıvının üst kısmından ilgili Reaktif tüpüne 20 µL Numune lizatı aktarın. Peletlerin karışmasını önlemek için açılı olarak dökün. Yukarı aşağı 5 kez pipetleyerek
nazikçe karıştırın.
4.3 Ayrı ayrı her Numune lizatı strip içindeki ilgili Reaktif tüpüne eklenene kadar 4.2 adımını tekrar edin.
4.4 Reaktif tüplerini, tedarik edilen ilave kapak ile kapatın ve kapağın sıkı bir şekilde kapatıldığından emin olmak amacıyla, aşağı yukarı hareketle basınç uygulamak üzere
3M Moleküler Tayin Kapak Takma/Kapak Sökme Aracı - Reaktif'in yuvarlak tarafını kullanın.
4.5 Gerektiği şekilde, test edilecek her bir numune için 4.1 ila 4.4 adımlarını tekrarlayın.
4.6 Tüm numune lizatları aktarıldığında, bir Reaktif tüpüne 20 µL NC lizatı aktarmak için 4.1 ila 4.4 adımlarını tekrar edin.
4.7 Bir RC tüpü içine 20 µL NC lizatı aktarın. Peletlerin karışmasını önlemek için açılı olarak dökün. Yukarı aşağı 5 kez pipetleyerek nazikçe karıştırın.
0-20ºC 20-25ºC
8
. 3M Moleküler Tayin Soğutma Bloğu Ek
(c)
3X
20-25ºC
3X
20-25ºC
TR
(Türkçe)