4.5 Wiederholen Sie bei Bedarf die Schritte 4.1 bis 4.4 bei allen zu prüfenden Proben.
4.6 Sobald Sie alle Probenlysate übertragen haben, wiederholen Sie die Schritte 4.1 bis 4.4, um 20 µl des NC-Lysats in ein Reagenzgefäß zu
übertragen.
4.7 Geben Sie 20 µl des NC-Lysats in ein RC-Gefäß. Halten Sie das Gefäß dabei in einem schrägen Winkel, um die Kügelchen nicht aufzurühren.
Mischen Sie den Gefäßinhalt dann, indem Sie ihn 5 Mal auf- und abpipettieren.
5. Beladen Sie eine saubere und sterilisierte 3M Molekulare Detektion – Beladehilfe mit den mit Kappen verschlossenen Gefäßen. Schließen und
verriegeln Sie die Klappe der 3M Molekulare Detektion – Beladehilfe.
6. Überprüfen und bestätigen Sie die Konfiguration des Testdurchlaufs in der 3M Molekulare Detektion – Software.
7. Klicken Sie auf die Schaltfläche "Start" in der Software und wählen Sie anschließend das zu verwendende Gerät. Die Klappe des gewählten Geräts
öffnet sich automatisch.
8. Setzen Sie die 3M Molekulare Detektion – Beladehilfe in das 3M Molekulare Detektion – Gerät und schließen Sie die Klappe, um mit dem Test zu
beginnen. Die Ergebnisse sind innerhalb von 75 Minuten verfügbar, obgleich positive Ergebnisse möglicherweise schneller erfasst werden.
9. Nehmen Sie nach Abschluss des Tests die 3M Molekulare Detektion – Beladehilfe aus dem 3M Molekulare Detektion – Gerät und entsorgen Sie
die Gefäße, indem Sie sie 1 Stunde lang in ausreichender Entfernung vom Vorbereitungsbereich in einer 1–5%igen Haushaltsbleichmittellösung
(v:v in Wasser) einweichen.
HINWEIS: Um das Risiko eines falsch positiven Ergebnisses infolge einer Kreuzkontamination zu vermeiden, öffnen Sie niemals Reagenzgefäße,
die amplifizierte DNS enthalten. Hierzu gehören auch die Reagenzkontroll-, die Reagenz- und die Matrixkontrollgefäße. Entsorgen Sie die
verschlossenen Reagenzgefäße, indem Sie sie 1 Stunde lang in ausreichender Entfernung vom Vorbereitungsbereich in einer 1–5%igen
Haushaltsbleichmittellösung (v:v in Wasser) einweichen.
AUSLEGUNG DER ERGEBNISSE
Die durch die Detektion der Nukleinsäurenamplifikation entstehende Lichtleistungskurve wird anhand eines Algorithmus ausgewertet. Die Ergebnisse
werden automatisch von der Software analysiert und je nach Ergebnis farbcodiert. Ein positives oder negatives Ergebnis wird durch die Analyse einer
bestimmten Anzahl an besonderen Kurvenparametern bestimmt. Die mutmaßlich positiven Ergebnisse werden in Echtzeit erstellt, während negative
und zu überprüfende Ergebnisse erst nach Abschluss des Testdurchlaufs dargestellt werden.
Vermutlich positive Ergebnisse sollten anhand der Standardarbeitsanweisungen (SOP) des Labors oder durch Befolgen der geeigneten
Referenzbestätigungsmethode
(1,2,3)
gefolgt von anschließendem Ausplattieren und Bestätigung von Isolaten mittels geeigneter biochemischer und serologischer Methoden, bestätigt
werden.
HINWEIS: Selbst ein negatives Ergebnis führt nicht zu einem Ergebnis von Null, da das System und die Amplifikationsreagenzien des
3M Molekulare Detektion – Listerien Nachweises über einen "Hintergrund" verfügen, der in relativem Verhältnis zur Lichteinheit (RLE) steht.
Falls es in seltenen Fällen zu einer ungewöhnlichen Lichtleistung kommt, wird diese vom Algorithmus als "Zu überprüfen" gekennzeichnet. 3M
empfiehlt, den Nachweis der so gekennzeichneten Proben zu wiederholen. Falls das Ergebnis weiterhin als "Zu überprüfen" gekennzeichnet wird,
bestätigen Sie das Ergebnis anhand Ihres bevorzugten Testverfahrens oder gemäß den jeweils geltenden Richtlinien.
Sollten Sie Fragen zu bestimmten Anwendungen oder Verfahren haben, besuchen Sie unsere Website unter www.3M.com/foodsafety oder wenden
sich an den lokalen 3M Verkaufsvertreter oder Händler.
LITERATURNACHWEISE:
1. US Food and Drug Administration Bacteriological Analysis Manual. Chapter 10: Detection and Enumeration of Listeria monocytogenes in Foods.
Section C-6. April 2011 Version.
2. US Department of Agriculture (USDA) FSIS Microbiology Laboratory Guidebook 8.08. Isolation and Identification of Listeria monocytogenes from
Red Meat, Poultry and Egg Products, and Environmental Samples. Effective Date: 6 Nov 2012.
3. ISO 11290-1. Microbiology of Food and Animal Feeding Stuffs – Horizontal Method for the Detection and Enumeration of Listeria monocytogenes.
Amendment 1, 2004-10-15.
4. ISO/IEC 17025. General requirements for the competence of testing and calibration laboratories.
5. ISO 7218. Microbiology of food and animal feeding stuffs – General rules for microbiological examination.
6. ISO 18593. Microbiology of food and animal feeding stuffs – Horizontal methods for sampling techniques from surfaces using contact plates and
swabs.
, beginnend mit der Überführung aus der Erstanreicherungs- in die Zweitanreicherungsbouillon (falls zutreffend),
20 µL
9
DE
(Deutsch)