Adición De Un Control Phix (Opcional) - Illumina NextSeq 1000 Guia Del Usuario

Guía del sistema de secuenciación NextSeq 1000 y 2000
Tipo de biblioteca*
Ampliseq para Illumina
Library PLUS
Illumina DNA Prep
Illumina DNA Prep with
Enrichment
Illumina Stranded Total
RNA con Ribo-Zero Plus
Illumina Stranded mRNA
Prep
Illumina DNA PCR-Free
TruSeq DNA Nano 350
TruSeq DNA Nano 550
TruSeq Stranded mRNA
100 % PhiX
* En el caso de los tipos de biblioteca que no se encuentren en la lista, comience con una concentración de
carga de 650 pM y optimícela en experimentos posteriores.
En esta tabla, se proporcionan ejemplos de concentraciones de carga. El sistema
NextSeq 1000/2000 es compatible con todos los kits de preparación de bibliotecas de Illumina, pero
la concentración de carga óptima puede variar.
2. Agite en vórtice brevemente y, a continuación, centrifugue a 280 × g durante un minuto.
3. Reserve la biblioteca diluida en hielo hasta que esté listo para la secuenciación.
Secuencie las librerías diluidas a la concentración de carga el mismo día en que se diluyen.
4. Continúe del modo indicado a continuación.
• Si va a añadir PhiX, consulte
• Si no va a añadir PhiX o va a realizar un experimento solo de PhiX, consulte
consumibles en el cartucho en
Adición de un control PhiX (opcional)
1. Combine los siguientes volúmenes en un microtubo de baja unión para preparar 20 µl de PhiX a
1 nM:
• PhiX a 10 nM (2 µl)
• RSB con Tween 20 (18 µl)
N.º de documento 1000000109376 v05 ESP
Para uso exclusivo en investigación. Prohibido su uso en procedimientos de diagnóstico.
Volumen de
Concentración
biblioteca a 2 nM
de carga (pM)
750
750
1000
750
750
1000
1200
1500
1000
650
Adición de un control PhiX (opcional) en
la página 47.
Volumen de RSB
con Tween 20 (µl)
(µl)
9
9
12
9
9
12
14,4 9,6
18
12
7,8 16,2
la página 46.
15
15
12
15
15
12
6
12
Carga de
46