Siemens Coat-A-Count TSH IRMA Manual Del Usuario página 30

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Agiter à température ambiante (15–
4
28°C) pendant 2 heures à 200
rotations/minutes sur agitateur.
Décanter complètement. Ajouter 2 ml
5
du tampon de lavage. Attendre 1 à 2
minutes, puis décanter
minutieusement. De nouveau ajouter
2 ml du tampon de lavage. Attendre 1
à 2 minutes, puis décanter, laisser
égoutter pendant 1 à 2 minutes sur
papier absorbant puis tapoter pour
éliminer les gouttelettes résiduelles.
Compter 1 minute dans un compteur
6
gamma.
Dans un compteur multipuits, éloigner
les tubes T d'au moins un espace
pour prévenir tout risque de
contamination.
Calcul des résultats et Contrôle
de Qualité
Pour calculer les concentrations de TSH à
partir d'une courbe standard représentée
en log-log, il faut, dans un premier temps,
corriger les coups par minute (cpm) de
chaque paire de tubes en soustrayant la
moyenne des cpm des tubes à liaison non
spécifique (standard A):
CPM corrigés = (Moyenne cpm) moins
(Moyenne cpm LNS)
Puis déterminer pour chaque doublet la
capacité de liaison en pourcentage
(%B/B
, ici nommée "%B/LM") de
3000
liaison maximale (LM), corrigée des cpm
dus au LNS des tubes H tubes considérés
à 100%:
% liaison = (cpm corrigés / cpm corrigés LM) ×
100
Utiliser le papier log-log 4 cycles pour la
construction de la courbe, en portant sur
l'axe des ordonnées les pourcentages de
liaison, et sur l'axe des abscisses les
valeurs des standards différents de zéro.
Tracer la courbe qui passe
approximativement par ces points. Relier
les points par des arcs ou des segments
de droite. Ne pas chercher à réaliser une
seule droite à partir des résultats. Les
concentrations des contrôles et des
inconnus dans le domaine de mesure du
standard zéro peuvent être lues à partir de
la droite par interpolation. Il est possible
de tracer un autre graphe à partir des 3
30
premiers standards pour apprécier les
valeurs proches de zéro.
Commentaires: Bien que d'autres
approches de calcul soit aussi
acceptables, la réduction des données
avec la méthode indiquée ci-dessus a
certains avantages du point de vue du
contrôle de qualité. En particulier, elle
donne une courbe d'étalonnage qui est
relativement linéaire avec les
représentations log-log et linéaire-linéaire,
et est relativement stable d'une dosage à
l'autre. Elle donne également des
paramètres déterminants pour le contrôle
de qualité, plus précisément, les valeurs
de % de liaison (%B/B
pour les standards différents de zéro. Un
graphique encore plus utile, donnant une
idée de la reproductibilité intra-essai, peut
être obtenu en représentant directement
le pourcentage de liaison de chaque
standard, par exemple sans faire un calcul
de valeur moyenne à partir des cpm des
doublets.
Alternatives: Le pourcentage de liaison
peut être aussi calculé directement à partir
de la moyenne des cpm, la correction par
la liaison non spécifique produit
habituellement une courbe de calibration
qui est pratiquement linéaire sur tout le
domaine. Une courbe de calibration peut
être aussi créée en portant directement
sur l'ordonnée les cpm ou la moyenne des
cpm et en abscisse la concentration sur
du papier log-log ou linéaire-linéaire (le
papier semi-log ne doit pas être utilisé).
Cette méthode à l'avantage de sa
simplicité mais elle est moins
recommandée pour ce qui concerne le
Contrôle de Qualité.
Traitement informatique des données :
Les méthodes "Point-par-point", incluant
les fonctions de lissage linéaire, peuvent
être utilisées ; bien qu'elles ne permettent
qu'une faible assistance pour le suivi de la
qualité des tests, il est important de tracer
en log-log, selon les recommandations, la
courbe d'étalonnage, soit manuellement
soit informatiquement, en considérant que
c'est une étape du Contrôle de Qualité. Le
traitement des données utilisant des
fonctions polynomiales de 4ème ou 5ème
degré est aussi possible et est adapté.
Garder à l'esprit, cependant, que certains
algorithmes actuellement utilisés peuvent
ne pas être adaptés. Si une de ces
méthodes semble adaptée, il est essentiel
Coat-A-Count TSH IRMA (PIIKTS-8, 2010-11-04)
ou "%B/LM)
3000
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