Siemens Coat-A-Count TSH IRMA Manual Del Usuario página 22

valores diferentes, dependiendo del
material del tubo y de los aditivos,
incluyendo barreras de gel o barreras
físicas, activadores de la coagulación y/o
anticoagulantes. El Coat-A-Count TSH
IRMA no ha sido analizado con todos los
distintos tipos de tubos. Para obtener
detalles sobre los tipos tubos que se han
analizado, consulte la sección de Tipos de
Muestras Alternativos.
Volumen requerido: 200 µl of suero por
tubo
Conservación: 2–8°C durante 5 días, o
durante 1 mes a –20°C.
Antes del ensayo, llevar todas las
muestras a temperatura ambiente (15–
28°C) y mezclar por inversión. Alicuotar, si
es necesario, para evitar la repetición de
congelación y descongelación. No intentar
la descongelación de muestras
congeladas calentándolas en un baño de
agua.
Ensayo Inmunométrico
Todos los componentes deben llevarse a
temperatura ambiente (15–28°C) antes de
su uso.
Marcar 16 tubos recubiertos con TSH
1
Ab con A (unión no específica) y
desde B a H ("unión máxima") en
duplicado. Marcar también en
duplicado, tubos recubiertos con TSH
Ab, para controles y muestras de
pacientes.
Si se requieren tubos de Conteos
Totales para reducción de datos,
marcar con T (conteos totales) dos
tubos de poliestireno limpios (sin
recubrir) de 12x75 mm por duplicado.
Calibradores
A (NSB)
B
C
D
E
F
G
H ("MB")
Pipetear 200 µL de cada calibrador,
2
controles y muestras de suero de
22
20
µIU/ml
0
0,15
0,5
1,5
4
15
30
60
pacientes en los tubos preparados al
efecto.
Pipetear directamente al fondo del
tubo. Las muestras que se espera
contiene concentraciones deTSH
mayores al calibrador mas alto
(60 µIU/ml) deberán diluirse en el
calibrador cero antes del ensayo. Se
recomienda el empleo de
micropipetas con puntas desechables
para evitar acarreo de muestra a
muestra. Se deberán usar pipetas de
desplazamiento positivo y pipetores-
dilutores únicamente si se ha
evaluado la posibilidad de acarreo y
se haya encontrado insignificante.
Agregar 100 µl de TSH Ab I125 a
3
cada tubo.
Pipetear directamente al fondo del
tubo, y asegurarse de que la muestra
y el trazador están mezclados
completamente, sin espumar. Se
recomienda un dispensador de
repetición. Separe tos tubos T
(opcional) para conteo en el paso 6;
no requieren de mayor
procesamiento.
Agitar a temperatura ambiente (15–
4
28°C) durante 2 horas sobre una
gradilla agitadora colocada a 200
golpes por minuto.
Decantar completamente. Agregar
5
2 ml de Solución de Lavado Buffer a
cada tubo. Esperar de 1 a 2 minutos,
y decantar completamente. Agregar
otra vez 2 ml de Solución de Lavado
tamponada, esperar de 1 a 2 minutos
y decantar completamente.
Eliminar toda la humedad visible para
mejorar la precisión. Después del
segundo lavado, utilizando una
gradilla de decantación de espuma,
decantar el contenido de todos los
tubos (excepto los tubos T) y
permítales escurrir durante 2 a 3
minutos. Golpear los tubos contra
papel absorbente para eliminar las
gotas residuales.
Contar durante 1 minuto en un
6
contador gamma.
En los contadores gamma
multicabezas, los tubos de Conteos
Totales (opcional) deberán separarse
del resto de los tubos de ensayo por
cuando menos un espacio, para
Coat-A-Count TSH IRMA (PIIKTS-8, 2010-11-04)