Resumen Y Explicación Del Assay; Principios Del Procedimiento - BioCratis IDYLLA EGFR Instrucciones De Uso

4 Resumen y explicación del Assay
4 Resumen y explicación del Assay

4.1 Principios del procedimiento

El Sistema Idylla™ de Biocartis cubre el proceso completo desde la muestra hasta el resultado con una
preparación de la muestra completamente integrada seguida de una amplificación de la PCR en tiempo real y
detección de las secuencias objetivo. El Sistema Idylla™ consta de la Consola Idylla™ conectada a uno o más
Instrumentos Idylla™. Los Cartuchos Idylla™, diseñados para aplicaciones específicas, se pueden procesar en el
Sistema Idylla™ utilizando software específico para EGFR (Paquete de Tipo Test, EGFR TTP).
El software específico para EGFR Idylla™ (EGFR TTP) analiza automáticamente los datos de PCR obtenidos. Se han
validado el procedimiento del Test y los análisis de datos para su utilización con muestras FFPE.
I
NFORMACIÓN
Para obtener una descripción completa del Sistema Idylla™, consulte el Manual del Operador de Idylla™.
El Idylla™ EGFR Mutation Test detecta mutaciones de exón 18 (G719A/C/S), exón 20 (T790M, S768I) y exón 21
(L858R, L861Q), deleciónes de exón 19 e inserciones de exón 20 del gen EGFR.
Los Cartuchos del EGFR Test están listos para usarse y contienen los reactivos necesarios para llevar a cabo la
preparación de la muestra, la amplificación mediante PCR y la detección en tiempo real, comenzando a partir de
la inserción de secciones de tejido FFPE.
Los pasos del proceso del Idylla™ EGFR Mutation Test son los siguientes:
Licuación y lisis celular de FFPE:
l
Tras la inserción de la sección de tejido FFPE en el Cartucho, una combinación de reactivos químicos,
enzimas, calor y ultrasonido focalizado de alta intensidad (HIFU) induce la desparafinación, el trastorno del
tejido y la lisis de células. Se liberan los ácidos nucleicos y están listos para la posterior amplificación de la
PCR.
PCR en tiempo real que usa los cebadores específicos para un alelo:
l
Se amplifica el ADN, y las secuencias de destino se detectan mediante fluorescencia.Todos los reactivos PCR
necesarios están presentes en una fórmula estable y se utilizan para detectar mutaciones de exón 18
(G719A/C/S), exón 21 (L858R, L861Q) y exón 20 (T790M, S768I), deleciónes de exón 19 e inserciones de
exón 20 del gen EGFR.
La detección de estos objetivos específicos se realiza con sondas de etiquetado fluorescente. Durante la
amplificación y detección específicas se generan unas señales fluorescentes que son analizadas por el software
específico para EGFR (TTP) y se traducen a llamadas genéticas.
Al final de la ejecución, se muestra en la pantalla de la Consola un resultado que indica la presencia, ausencia o
no validez de cada mutación o grupo de mutaciones en el gen EGFR en la muestra analizada. En la siguiente tabla
se recogen las mutaciones detectadas por el Idylla™ EGFR Mutation Test.
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EGFR