Rendimiento; Sensibilidad Analítica - BioCratis IDYLLA EGFR Instrucciones De Uso

12 Rendimiento

12 Rendimiento
Durante los estudios de rendimiento se han obtenido los siguientes datos:
Sensibilidad analítica (límite de detección)
l
Especificidad analítica
l
Reproducibilidad
l
Precisión: rendimiento del Idylla™ EGFR Mutation Test en comparación con un método de referencia
l
Sustancias de interferencia
l
Conmutabilidad
l
12.1 Sensibilidad analítica
El límite de detección (LOD, por sus siglas en inglés) viene definido por la menor frecuencia alélica en la que los
alelos mutantes pueden detectarse de forma sistemática en ≥95 % de los tests de unos datos dados. Los datos
de 2500 copias de antecedentes FFPE silvestres (WT, por sus siglas en inglés) en cada una de las cinco
reacciones PCR multiplexadas de un Cartucho son representativos para una muestra de tejido de FFPE CPNM
estándar.
Se estimó el LOD para 20 mutaciones objetivo del Idylla™ EGFR Mutation Test. Por tanto, las diluciones en serie
que cubren una gama de frecuencias alélicas (del 1 % al 15 %) de cada mutante se probaron en diferentes
niveles de datos de antecedentes WT FFPE en la reacción PCR (de 200 copias a 5000 copias). Las diluciones en
serie se prepararon a partir de oligonucleótidos de ADN objetivo sintéticos que albergan la mutación y se
añadieron al estándar de referencia de WT FFPE de EGFR licuado. Los test se llevaron a cabo mediante un
enfoque de dos pasos: (1) un estudio de rangos de dosis con seis repeticiones por cada dilución (3 diluciones en
3 niveles de datos) y (2) un estudio refinado con doce repeticiones para un rango de diluciones más concreto
cerca del LOD estimado (2 diluciones en 2 niveles de datos). Se usaron cartuchos de tres lotes de Idylla™ EGFR
Mutation Test diferentes. Se ha utilizado la tasa de positividad de mutaciones de las diluciones en serie para
calcular el LOD mediante regresión logística. En la Tabla 6 se proporciona el LOD de cada mutante en un nivel de
datos de 1000 y 2500 copias de antecedentes WT, con el valor Cq correspondiente del control de EGFR (valor
Cq medio del control de EGFR de todos los tests LOD realizados en el nivel de datos correspondiente).
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