Preparación De Reactivos Para La Lectura 2 - Illumina HiSeq 2000 Manual De Uso

Guía del sistema HiSeq 2000
Visualización de los criterios de medición
Cuando los criterios de medición estén disponibles, el visor del análisis de secuenciación (SAV) se abrirá
automáticamente y los mostrará. Los datos aparecen en forma de diagramas, gráficos y tablas. Si desea
obtener más información, consulte la Guía del usuario del visor del análisis de secuenciación (n.º de
documento 15020619).
1 Para ver los datos actualizados, seleccione Refresh (Actualizar) en cualquier momento durante
el experimento.
Preparación de reactivos para la Lectura 2
Antes de finalizar la Lectura 1 y cualquier lectura del índice, prepare los reactivos para la resíntesis de la
Lectura 2 y el ICB nuevo para la Lectura 2. Cargue los reactivos cuando se lo solicite el software de control.
Preparación de reactivos "paired-end"
Los reactivos "paired-end" se emplean durante el paso de resíntesis de la Lectura 2 de un experimento de
secuenciación "paired-end".
NOTA
Las bibliotecas de Nextera necesitan HP11, un cebador de secuenciación incluido en la caja TruSeq Dual
Index Sequencing Primer Box. Las demás bibliotecas utilizan HP7.
Descongelación de los reactivos "paired-end"
1 Extraiga los reactivos siguientes, almacenados a una temperatura de entre −25 °C y −15 °C.
Para los experimentos no indexados o de un solo índice: AMX2, APM2, AT2, BMX, HP3, HP7 o
u
HP11, HT2, LMX2 y RMR
Para los experimentos de doble índice: AMX2, APM2, AT2, BMX, HP3, HP7 o HP11, HT2 y LMX2
u
Para los experimentos "paired-end": HP3.
u
2 Descongele los reactivos en un vaso de precipitados lleno de agua desionizada a temperatura ambiente
durante aproximadamente 20 minutos.
3 Deje reposar en hielo los reactivos AMX2, BMX, LMX2 y RMR.
Preparación de AMX2, APM2, AT2, BMX, HP3, HP7, HP11, HT2 y LMX2
1 Invierta cada tubo para mezclar la solución.
2 Centrifugue a 1000 r/min durante 1 minuto.
3 Deje reposar en hielo los reactivos AMX2, BMX y LMX2.
4 Deje reposar a temperatura ambiente los reactivos APM2, AT2, HP3, HP7, HP11 y HT2.
Preparación de HP3 para experimentos "paired-end"
1 Invierta para mezclar y, después, realice un centrifugado.
2 Transfiera 2,85 ml de PW1 a un tubo cónico de 15 ml vacío y, después, añada 150 µl de HP3.
3 Invierta para mezclar.
4 Centrifugue a 1000 r/min durante 1 minuto.
N.º de documento 15011190 v02 ESP
Para uso exclusivo en investigación. Prohibido su uso en procedimientos de diagnóstico.
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