Capítulo 3 Preparación De Reactivos; Celda De Flujo De Hiseq X; Introducción; Prácticas Óptimas - Illumina cBot Guía Del Sistema

Capítulo 3 Preparación de reactivos
Introducción

Celda de flujo de HiSeq X

Celda de flujo de HiSeq 3000/4000
Celda de flujo de rendimiento elevado de HiSeq
Celda de flujo rápido de HiSeq
Introducción
Las instrucciones de preparación de reactivos dependen del kit de reactivos que utilice. Las instrucciones se
clasifican según el tipo de celda de flujo e incluyen HiSeq X, HiSeq 3000/4000, el modo de rendimiento
elevado de HiSeq y el modo rápido de HiSeq.
Tras su preparación, los reactivos de generación de grupos están listos para cargarse en el sistema cBot
cuando el software lo solicite.
Prácticas óptimas
Lleve guantes nuevos cuando prepare reactivos de generación de grupos.
u
No extraiga la tapa protectora de plástico transparente de la placa de reactivos hasta que no esté listo
u
para cargar reactivos en cBot. No perfore los cierres metálicos.
Sujete las placas de reactivos que contengan gradillas de ocho tubos por la base para evitar que se
u
salgan los tubos de reactivos. Asegúrese de que los tubos están bien fijados a la placa de reactivos antes
y después de realizar una agitación en un mezclador de vórtice o una inversión. Los tubos sueltos
pueden dañar el distribuidor de cBot.
Durante la generación de grupos en una celda de flujo de HiSeq X o HiSeq 3000/4000, prepare siempre
u
NaOH recién diluido para desnaturalizar bibliotecas. Este paso es vital para el proceso de
desnaturalización. Para evitar ligeros errores de pipeteo, prepare al menos 1 ml de NaOH 0,1 N recién
diluido.
Celda de flujo de HiSeq X
Prepare la celda de flujo de tramas HiSeq X y, a continuación, prepare los reactivos de generación de
grupos. Para preparar los reactivos de generación de grupos, descongele la placa de reactivos cBot y
prepare la mezcla maestra de ExAmp.
Si utiliza el kit de paquetes de diez unidades, prepare cuatro celdas de flujo y descongele cuatro placas de
reactivos de cBot. Asegúrese de que haya cuatro instrumentos cBot disponibles. Los reactivos no se
pueden almacenar tras su preparación.
Acerca de los reactivos
Los reactivos ExAmp son viscosos, en especial EPX2 y EPX3. Aspire y dispense los reactivos lentamente
u
para realizar un pipeteo preciso.
EPX3 no se vierte al invertirlo debido a su viscosidad.
u
Nunca realice una mezcla vorticial de los reactivos de ExAmp, y tampoco los vuelva a congelar tras
u
descongelarlos.
La mezcla maestra ExAmp puede presentar un aspecto turbio; es normal. Si la solución se separa en
u
una parte turbia y otra clara, realice un suave pipeteo para mezclar los líquidos.
N.º de documento 15006165 v05 ESP
Para uso exclusivo en investigación.
Prohibido su uso en procedimientos de diagnóstico.
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