Preparación De Icb Para Lectura 2 (No Indexada O Con Un Solo Índice); Preparación De Icb Para Lectura 2 (Con Doble Índice) - Illumina HiSeq 2000 Manual De Uso

Guía del sistema HiSeq 2000
5 Déjelo reposar a temperatura ambiente.
Preparación de RMR
1 Invierta para mezclar.
2 Centrifugue a 1000 r/min durante 1 minuto. No lo agite en un mezclador vorticial.
3 Déjela reposar en hielo.
Preparación de ICB para Lectura 2 (no indexada o con un solo índice)
1 Extraiga dos tubos de LFN de su almacenamiento a una temperatura de entre −25 °C y −15 °C, y
descongélelos en un vaso de precipitados lleno de agua desionizada a temperatura ambiente durante
aproximadamente 20 minutos.
2 Una vez descongelados, añada el contenido de dos tubos de LFN a la botella que contiene
47 ml de ICB.
3 Enjuague cada tubo de LFN con ICB para garantizar la transferencia de todo el LFN.
4 Añada 1,1 ml de EDP a la solución de ICB y LFN.
5 Almacene la parte sin usar de EDP a una temperatura de entre –25 °C y –15 °C.
6 Cierre la botella que contiene EDP, ICB y LFN, e inviértala para mezclarla.
7 Déjela reposar en hielo.
Preparación de ICB para Lectura 2 (con doble índice)
Utilice las siguientes instrucciones para calcular y preparar el volumen de ICB necesario para la Lectura 2 de
un experimento de doble índice.
1 Mida los siguientes volúmenes de EDP, ICB y LFN para cada 10 ciclos de la secuenciación que vaya a
realizar en la Lectura 2.
Reactivo Volumen por 10 ciclos
ICB 4,57 ml
LFN 0,6 ml
EDP 0,11 ml
Para obtener más información sobre cómo calcular volúmenes, consulte
33.
2 Transfiera el volumen de ICB medido a una botella de 250 ml vacía.
3 Añada el volumen de LFN medido a la nueva botella de ICB.
4 Enjuague cada tubo de LFN con ICB para garantizar la transferencia de todo el LFN.
5 Añada el volumen de EDP medido a la solución de ICB y LFN.
6 Enjuague el tubo de EDP con la solución de ICB y LFN para asegurarse de que se transfiera todo el EDP.
7 Cierre la botella que contiene EDP, ICB y LFN, e inviértala para mezclarla.
8 Déjela reposar en hielo.
N.º de documento 15011190 v02 ESP
Para uso exclusivo en investigación. Prohibido su uso en procedimientos de diagnóstico.
Almacenamiento
Entre 2 °C y 8 °C
Entre –25 °C y –15 °C
Entre –25 °C y –15 °C
Ejemplo de cálculo en la página
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