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Protocolo: purificación de ARN vírico mediante una microcentrifugadora
o los instrumentos QIAcube/QIAcube Connect MDx
Para la purificación de ARN vírico a partir de 140 µl de plasma, suero, orina, medio de
cultivos
celulares
microcentrifugadora o de forma automatizada con los instrumentos QIAcube o QIAcube
Connect MDx. Los volúmenes iniciales superiores, de hasta 560 µl (en múltiplos de 140 µl),
se pueden procesar incrementando los volúmenes iniciales de manera proporcional
y cargando la columna de centrifugación QIAamp Mini varias veces, como se describe
a continuación en el protocolo. Algunas muestras con concentraciones víricas muy bajas
deben concentrarse antes del procedimiento de purificación; consulte el apartado "Protocolo:
Concentración de las muestras" (página 32).
Cuestiones importantes antes de comenzar
Consulte el apartado "Procedimiento" (páginas 22-29) antes de iniciar el protocolo.
Todos los pasos de centrifugación se realizan a temperatura ambiente (15-25 °C).
El procesamiento automatizado de 2-10 o 12 muestras se puede realizar en los
instrumentos QIAcube y QIAcube Connect MDx.
Para el proceso automatizado, siga las instrucciones que aparecen en las hojas de protocolo
(QIAcube) o en la pantalla del software (QIAcube Connect MDx), y consulte los manuales del
usuario correspondientes (de los instrumentos QIAcube y QIAcube Connect MDx).
Antes de comenzar
Deje que las muestras se equilibren a temperatura ambiente.
Para la elución en el paso 11, deje que el Buffer AVE se equilibre a temperatura ambiente.
Asegúrese de que el Buffer AW1 y el Buffer AW2 se hayan preparado siguiendo las
instrucciones que se indican en la página 26.
Solo para el procedimiento manual: añada ARN transportador reconstituido en el
Buffer AVE al Buffer AVL según las instrucciones de la página 24.
Instrucciones de uso del QIAamp DSP Viral RNA Mini Kit (manual de uso) 01/2021
o
líquidos
y
secreciones
corporales
extracelulares
con
una
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