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ARN transportador
El ARN transportador tiene dos funciones. En primer lugar, potencia la unión de los ácidos
nucleicos víricos a la membrana de la columna de centrifugación QIAamp Mini,
especialmente si en la muestra hay pocas moléculas diana. En segundo lugar, la adición de
grandes cantidades de ARN transportador reduce las posibilidades de degradación del ARN
vírico en el caso poco frecuente de que las moléculas de ARNasa no se desnaturalicen por
efecto de las sales caótropas y del detergente de Buffer AVL. Si no se añade ARN
transportador al Buffer AVL, la recuperación del ARN vírico puede ser menor.
La cantidad de ARN transportador liofilizado suministrado es suficiente para el volumen de
Buffer AVL proporcionado con el kit. La concentración de ARN transportador se ha ajustado
de modo que el QIAamp DSP Viral RNA Mini Kit se pueda utilizar como un sistema de
purificación genérico compatible con un gran número de sistemas de amplificación y es
adecuada para una amplia gama de virus de ARN.
La eficacia de los diferentes sistemas de amplificación varía en función de la cantidad total
de ácido nucleico presente en la reacción. Los eluidos de este kit contienen ácidos nucleicos
víricos y ARN transportador y las cantidades de ARN transportador superarán ampliamente
las cantidades de ácidos nucleicos víricos. Por consiguiente, la cantidad de eluido que se
debe añadir a las amplificaciones anterógradas debe calcularse en función de la cantidad
de ARN transportador añadido. Para obtener los niveles máximos de sensibilidad en las
reacciones de amplificación, puede ser necesario ajustar la cantidad de ARN transportador
añadido al Buffer AVL.
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Instrucciones de uso del QIAamp DSP Viral RNA Mini Kit (manual de uso) 01/2021
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