Tabla de contenido
centrifugación a velocidades inferiores para la carga del lisado y el primer paso de lavado,
siempre toda la solución se transfiera a través de la membrana. En el segundo paso de lavado,
es muy recomendable la centrifugación a máxima velocidad.
Todos los pasos de centrifugación deben realizarse a temperatura ambiente.
Protocolo: Concentración de las muestras
El plasma, el suero, la orina, el líquido cefalorraquídeo, la médula ósea y otros líquidos y
secreciones corporales generalmente tienen concentraciones víricas muy bajas. En estos casos,
se recomienda la concentración de las muestras de hasta 3,5 ml a un volumen final de 140 µl.
Cuestión importante antes de comenzar
Utilice microconcentradores de centrifugación como Microsep 100 (Filtron: 3,5 ml,
n.º de cat. OD100C40), Ultrafree
o equivalentes de otros proveedores.
Procedimiento
1. Dispense hasta 3,5 ml de muestra al microconcentrador siguiendo las instrucciones del
fabricante.
2. Realice la centrifugación de acuerdo con las instrucciones del fabricante hasta lograr un
volumen final de 140 µl.
Puede resultar complicado que algunas muestras, en concreto el plasma, se concentren a
140 µl debido a su elevada viscosidad. Es posible que sea necesaria una centrifugación
de hasta 6 horas.
3. Pipetee 140 µl de la muestra concentrada en un tubo de microcentrifugadora de 1,5 ml y
siga el protocolo de centrifugado QIAamp DSP Viral RNA que se indica en la página 33.
32
-CL (Millipore: 2 ml, n.º de cat. UFC4 THK 25)
®
Instrucciones de uso del QIAamp DSP Viral RNA Mini Kit (manual de uso) 01/2021
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