Tabla de contenido
Solo se debe utilizar etanol, ya que el uso de otros alcoholes puede reducir el rendimiento
y la pureza del ARN. No utilice alcohol desnaturalizado, que contiene otras sustancias
como metanol o metiletilcetona. Para que la unión sea eficaz, es esencial que la muestra
y el etanol se mezclen bien a fin de obtener una solución homogénea. El tubo de recogida
del blíster se puede almacenar para la centrifugación que se indica en el paso 13.
6. Asegúrese de que la válvula de vacío principal (entre la bomba de vacío y el colector de
vacío) y la válvula con tapón de rosca (en el colector de vacío del QIAvac 24 Plus) estén
cerradas. Conecte la bomba de vacío pulsando el interruptor de encendido.
El vacío solamente se aplica al sistema de conexión (si se utiliza) y no al colector de vacío.
Nota: Para tener una liberación práctica de la presión de vacío, se debe utilizar el QIAvac
Connecting System o el Vacuum Regulator; consulte el apartado "Materiales necesarios
pero no suministrados" (página 16).
7. Dispense cuidadosamente 630 µl del lisado obtenido en el paso 5 en la columna de
centrifugación QIAamp Mini procurando no mojar el borde. Evite tocar la membrana de
la columna de centrifugación QIAamp Mini con la punta de pipeta.
8. Abra la válvula principal de vacío. Asegúrese de dejar abierta la tapa de la columna de
centrifugación QIAamp Mini mientras aplica vacío. Una vez que todos los lisados hayan
atravesado la columna de centrifugación QIAamp Mini, cierre la válvula principal de
vacío y abra la válvula con tapón de rosca para ventilar el colector. Cierre la válvula con
tapón de rosca una vez que el vacío haya desaparecido del colector.
Tras cerrar la válvula principal de vacío, el vacío solamente se aplica al sistema de conexión
(si se utiliza) y no al colector de vacío. Si los lisados de muestras individuales no han atravesado
por completo la membrana a pesar de que las VacValves de las demás columnas de
centrifugación QIAamp Mini estaban cerradas, ponga la columna de centrifugación QIAamp
Mini en un tubo de lavado (WT) limpio de 2 ml, cierre la tapa y centrifugue a máxima
velocidad durante 3 minutos o hasta que hayan atravesado la membrana por completo.
Continúe con los pasos 7-11 del protocolo de centrifugado que se indica en la página 35 para
finalizar el procedimiento. La centrifugación se debe realizar a aproximadamente 6000 × g
para limitar el ruido de la microcentrifugadora. La centrifugación a máxima velocidad no
afectará al rendimiento ni a la pureza del ARN vírico.
38
Instrucciones de uso del QIAamp DSP Viral RNA Mini Kit (manual de uso) 01/2021
Tabla de contenido
