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Protocolo: Purificación de ADN genómico a partir de
sangre total utilizando el EZ1 Advanced XL
Puntos importantes antes de empezar
En caso de utilizar el kit EZ1 DSP DNA Blood por primera vez, lea el capítulo
"Notas importantes" (página 29).
Los cartuchos de reactivos (RCB) contienen sales de guanidina y, por tanto,
no son compatibles con desinfectantes que contengan lejía. Tome las
medidas de seguridad apropiadas y utilice guantes al manipularlos. Consulte
la página Fehler! Textmarke nicht definiert. para ver la información de
seguridad.
Todos los pasos del protocolo deben realizarse a temperatura ambiente
(15–25 °C). Durante el procedimiento de instalación, trabaje con rapidez.
Después de recibir el kit, revise si hay daños en los componentes de éste. Si
los cartuchos de reactivos (RCB) u otros componentes del kit están dañados,
contacte con los Servicios Técnicos QIAGEN o con su distribuidor local. En
caso de derrame de líquido, consulte el capítulo "Fehler! Verweisquelle
konnte nicht gefunden werden." (página Fehler! Textmarke nicht definiert.).
No utilice los cartuchos de reactivos (RCB) u otros componentes del kit que
estén dañados ya que su uso puede llevar a un pobre rendimiento del kit.
La cantidad de ADN genómico depende del número de leucocitos en la
muestra.
Cosas que hacer antes de comenzar
El tampón de lisis en el cartucho de reactivos (RCB) puede formar un
precipitado al almacenarse. Equilibre el cartucho de reactivos (RCB) a
temperatura ambiente (15-25 °C) antes de usarlo. De ser necesario,
redisuelva calentándolo a 30–40 °C y luego coloque a temperatura
ambiente.
El protocolo incluye una opción para realizar lavados con etanol al 80% en
lugar del tampón suministrado en el cartucho de reactivos. Esto puede
ofrecer ventajas para algunas aplicaciones posteriores. Si se selecciona esta
opción, se deberán colocar en la fila 3 de la mesa de trabajo (véase figura
12, página 33) tubos de 2 ml con 1800 µl cada uno de etanol al 80%. Para
preparar etanol al 80% suficiente para 14 muestras, añada 6 ml de agua
libre de nucleasas a 24 ml de etanol al 100%.* Siga las instrucciones de los
mensajes que aparecen en pantalla.
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Manual de uso del kit EZ1 DSP DNA Blood 02/2015
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