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Preparación de reactivos y tampones
Adición del ARN transportador al Buffer AVL* (solo para el procedimiento manual)
Añada 310 μl de Buffer AVE al tubo con 310 μg de ARN transportador liofilizado para
obtener una solución de 1 µg/µl. Disuelva bien el ARN transportador, repártalo en
alícuotas del tamaño adecuado y guárdelas a una temperatura de –25 °C a –15 °C. No
congele y descongele las alícuotas del ARN transportador más de 3 veces.
Compruebe si hay precipitado en el Buffer AVL y, si es necesario, incúbelo a una temperatura
de 80 °C ± 3 °C hasta que se disuelva el precipitado. Calcule el volumen necesario de mezcla
de Buffer AVL y ARN transportador por lote de muestras; para ello, seleccione en la Tabla 1
(página 25) el número de muestras que se van a procesar simultáneamente.
Para grandes cantidades de muestras, se pueden calcular los volúmenes con el cálculo de
muestras que aparece a continuación:
donde: n = número de muestras que se van a procesar simultáneamente
Mezcle cuidadosamente invirtiendo el tubo diez veces. Para evitar la formación de espuma,
no realice una agitación vorticial.
Nota: El procedimiento de preparación de la muestra está optimizado para 5,6 µg de
ARN transportador por muestra. Si ha comprobado que para su sistema de amplificación
es preferible una menor cantidad de ARN transportador, transfiera solo la cantidad
necesaria de ARN transportador disuelto a los tubos que contienen el Buffer AVL. (El uso
de menos de 5,6 µg de ARN transportador por muestra debe validarse para cada tipo de
muestra y de ensayo anterógrado concreto).
* Contiene sales caótropas. Adopte las medidas de seguridad de laboratorio adecuadas y utilice guantes durante la
manipulación. No compatible con agentes desinfectantes que contengan lejía. Consulte la página 17 si desea obtener
información de seguridad.
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n × 0,56 ml = y ml
y ml × 10 µl/ml = z
y = volumen calculado del Buffer AVL
z = volumen de ARN transportador y Buffer AVE que se debe
añadir al Buffer AVL
Instrucciones de uso del QIAamp DSP Viral RNA Mini Kit (manual de uso) 01/2021
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