g) Demasiado eluido en
la reacción de
amplificación
h) Obtención variable de
resultados en ensayos
posteriores usando
ácidos nucleicos
purificados
i) Falta de sensibilidad
debido a sustancias
inhibitorias
j) Nuevas combinaciones
de transcriptasa inversa
y ADN polimerasa Taq
Manual de uso del kit EZ1 DSP Virus 03/2015
Comentarios y sugerencias
Determine el volumen máximo de eluido
adecuado para su reacción de amplificación.
Reduzca el volumen de eluido agregado a la
reacción de amplificación o aumente el volumen
de la elución según corresponda. Se puede
agregar un control positivo, si se desea, para
determinar el efecto del eluido en la reacción de
amplificación.
Los componentes de sal y etanol de tampón de
lavado 1 o tampón de lavado 2 en el cartucho
(RCV) pueden haberse separado debido al
almacenamiento prolongado. Siempre agite
bien los cartuchos (RCV) y deles unos golpes
suaves antes de empezar un procedimiento de
purificación.
Aumente el volumen de elución. Se puede
agregar al eluido un control positivo, si se
desea, para determinar el efecto del volumen de
elución en la reacción de amplificación. Si los
eluidos obtenidos de las muestras de heces están
turbios, recomendamos centrifugarlos a
velocidad máxima (20 000 x g) durante
3 minutos ± 30 segundos para aclararlos. Esto
no afectará negativamente a los eluidos
transparentes, pero mejorará el rendimiento de
los eluidos turbios en las aplicaciones
posteriores.
Si las enzimas se cambian, puede que se haga
necesario reajustar la cantidad de ARN
transportador (CARRIER) agregada al tampón de
elución (AVE) y la cantidad de eluido utilizada.
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