Descongelación De Muestras; Obtención De Adn Purificado - Qiagen EZ1 Manual De Uso

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promedio de obtención relativo de ADN (en comparación con la obtención teórica) con
desviación estándar.
Descongelación de muestras
Se pueden utilizar muestras de sangre humana total congeladas o recién
extraídas (vea "Almacenamiento de muestras de sangre", página 29). Se han
analizado los efectos de la congelación y descongelación de muestras de
sangre teniendo en cuenta la purificación del ADN utilizando el sistema EZ1
DSP DNA Blood (Figura 2).
100
90
80
70
60
50
40
30
20
10
0
Figura 2. Influencia de ciclos de congelación-descongelación en la obtención de ADN.
La sangre total se extrajo de 3 donantes sanos en los tubos indicados con 6 réplicas cada
uno. Los tubos utilizados se muestran en la tabla 1. El ADN genómico se purificó de 350 µl de
cada muestra utilizando el sistema EZ1 DSP DNA Blood, y valores medios de obtención de
ADN relativo (Fresca) fueron calculados para cada donante y cada tubo. Los tubos que
contenían la sangre se congelaron y descongelaron 3 veces. El ADN genómico se purifico
después de cada ciclo de congelamiento-descongelamiento (Ciclo 1 – Ciclo 3) utilizando el
sistema EZ1 DSP DNA Blood y se determinó la obtención relativa de ADN. Para congelación-
descongelación, se recomiendan tubos con EDTA como anticoagulante.
Obtención de ADN purificado
El ADN genómico se purificó a partir de 350 µl muestras de sangre de
donantes sanos. La cantidad de ADN purificado utilizando el procedimiento
EZ1 DSP DNA Blood depende del contenido de glóbulos blancos de cada
muestra de sangre, y lo obtenido puede variar de donante a donante
(Figura 3).
Manual de uso del kit EZ1 DSP DNA Blood 02/2015
BD Vacutainer K2E
Fresca
Fresca
Fresh
Ciclo 1
Cido 1
Cycle 1
Ciclo 2
Cido 2
Cycle 2
Ciclo 3
Cido 3
Cycle 3
BD Vacutainer 9NC
13
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