Preparación De La Celda De Flujo Y La Plataforma - Illumina NovaSeq 6000 Guia Del Usuario

Guía del sistema de secuenciación NovaSeq 6000
Desnaturalización de grupos de bibliotecas y control PhiX opcional
1 Añada NaOH a 0,2 N al tubo de bibliotecas no desnaturalizadas y un control PhiX opcional como se
describe a continuación.
Modo NaOH (µl) a 0,2 N
SP/S1
S2
S4
2 Tape y mezcle bien brevemente.
3 Centrifugue a 280 × g, como máximo, hasta 1 minuto.
4 Incube a temperatura ambiente durante 8 minutos para desnaturalizar.
5 Añada 400 mM de Tris-HCl, pH 8 para neutralizar como se indica a continuación.
Modo
SP/S1
S2
S4
6 Tape y mezcle bien brevemente.
7 Centrifugue a 280 × g, como máximo, hasta 1 minuto.
8 Mantenga las bibliotecas desnaturalizadas en hielo hasta que estén listas para añadir la mezcla maestra
de ExAmp.
9 [Opcional] Si no puede proceder de forma inmediata, tape el tubo y almacénelo a entre –25 °C y –15 °C
hasta tres semanas. No lo congele después de descongelarlo.
PRECAUCIÓN
Solamente debe almacenar grupos de bibliotecas desnaturalizadas si es necesario. El almacenamiento
a largo plazo puede aumentar los duplicados, con la consiguiente reducción del rendimiento.
Preparación de la celda de flujo y la plataforma
1 Coloque la plataforma de la celda de flujo de NovaSeq Xp sobre una superficie plana. Mantenga la celda
de flujo nivelada hasta cargarla en el instrumento.
2 Inspeccione la plataforma y asegúrese de que no contiene partículas.
3 Póngase un par de guantes nuevos sin polvo para evitar contaminar la superficie de vidrio de la celda de
flujo.
4 Con el envase metálico de la celda de flujo ubicado en una superficie plana, ábralo tirando desde la
pestaña de la esquina.
5 Quite el retenedor de plástico transparente que cubre la celda de flujo.
6 Extraiga la celda de flujo del embalaje. Sujete la celda de flujo por los laterales sin tocar el vidrio ni las
juntas de la parte inferior.
7 Si hay partículas visibles en alguna de las superficies de vidrio, límpiela con un paño sin pelusa
humedecido en alcohol y séquela con una toallita de laboratorio sin pelusa.
N.º de documento 1000000019358 v11 ESP N.º de material 20023471
Para uso exclusivo en investigación.
Prohibido su uso en procedimientos de diagnóstico.
Biblioteca no desnaturalizada (µl)
4,0
5,0
7,0
400 mM de Tris-HCl, pH 8 (µl)
5,0
6,0
8,0
Volumen resultante
18,0 22 µl o 22,7 µl con PhiX
22,0 27 µl o 27,8 µl con PhiX
30,0 37 µl o 38,1 µl con PhiX
Volumen resultante
27 µl o 27,7 µl con PhiX
33 µl o 33,8 µl con PhiX
45 µl o 46,1 µl con PhiX
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