Preparar La Celda De Flujo Y Las Bibliotecas - Illumina iSeq 100 Manual De Uso

Guía del sistema de secuenciación iSeq 100
5 Descongele el cartucho en bolsa con uno de los siguientes métodos. Úselo inmediatamente después de
descongelarlo y no vuelva a congelarlo ni almacenarlo.
Método
Baño de agua a una
temperatura entre 20 °C
y 25 °C
Refrigerador, entre
2 y 8 °C
Aire a temperatura
ambiente (entre 20 y
25 °C)
6 Si está mojado por el baño de agua, seque con papel absorbente.

Preparar la celda de flujo y las bibliotecas

Antes de cargar la celda de flujo y las bibliotecas en el cartucho, lleve la celda de flujo a temperatura
ambiente, diluya las bibliotecas y realice una adición opcional de PhiX. Las bibliotecas se desnaturalizan de
manera automática en el instrumento.
Las siguientes instrucciones de dilución se aplican a las bibliotecas de Illumina admitidas que sean de
cadena doble. Realice siempre un análisis de control de calidad, optimice la concentración de carga en
función del tipo de biblioteca y use un método de normalización que genere bibliotecas de cadena doble.
La normalización basada en bolas que genera bibliotecas de una sola cadena no es compatible con la
desnaturalización integrada.
Diluir biblioteca a 1 nM
1 Prepare la celda de flujo tal como se explica a continuación.
a Extraiga una nueva celda de flujo de su almacenamiento a una temperatura de entre 2 °C y 8 °C.
b Deje reposar el paquete sin abrir a temperatura ambiente durante un periodo de
entre 10 y 15 minutos para evitar la condensación.
Si se prepara ahora la celda de flujo, se asegura que alcance la temperatura ambiente a tiempo.
2 Retire el tampón de resuspensión (RSB) de su almacenamiento a unas temperaturas entre
–25 °C y –15 °C. Otra posibilidad es utilizar 10 mM de Tris-HCl, pH 8,5 en lugar del RSB.
3 [Opcional] Retire el control PhiX a 10 nM preparado del almacenamiento con unas temperaturas
comprendidas entre –25 °C y –15 °C.
Solo se requiere PhiX para una adición opcional o si se va a realizar un experimento solo de PhiX.
4 Descongele el RSB y el PhiX opcional a temperatura ambiente durante 10 minutos.
N.º de documento 1000000036024 v05 ESP
Para uso exclusivo en investigación.
Prohibido su uso en procedimientos de diagnóstico.
Tiempo de
Instrucción
descongelación
6 horas, no exceder las • Use 6 l de agua por cartucho.
• Realice un baño de agua con temperatura controlada a
18 horas
• Coloque la etiqueta de la bolsa hacia arriba, sumerja el
• No apile los cartuchos en el baño de agua a menos que
36 horas, no exceder Coloque el cartucho de forma que la etiqueta quede hacia
las 72 horas arriba y el aire pueda circular por todos los lados, incluida la
parte inferior.
9 horas, no exceder las Coloque el cartucho de forma que la etiqueta quede hacia
18 horas arriba y el aire pueda circular por todos los lados, incluida la
parte inferior.
25 °C o mezcle agua caliente y fría para alcanzar de 20 °C
a 25 °C.
cartucho por completo y aplique aproximadamente 2 kg de
peso para evitar que flote.
sea de temperatura controlada.
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