Tabla de contenido
Interfaz del usuario para análisis
donde:
7.6.4
Cuantificación relativa delta delta C
El método delta delta C
relativos de expresión génica. Fue descrito por Livak y
Schmittgen (2001)*.
Para este método no es necesario incluir curvas
estándar en cada serie analítica. Cada muestra se
normalizará primero para la cantidad de plantilla
añadida mediante la comparación con el gen de
normalización. Estos valores normalizados se vuelven a
normalizar con respecto a un tratamiento con un
calibrador. El calibrador puede ser p. ej. un gen
natural, un control sin tratar o una muestra a tiempo
cero.
Es esencial que las eficacias de amplificación del gen
de interés y del gen de normalización sean idénticas y
que esto se valide según las directrices de Livak y
Schmittgen.
Es fundamental que los nombres de las muestras se
definan correctamente en la ventana "Edit Samples",
etiquetando de forma idéntica las mismas muestras en
cada análisis de cuantificación compuesto.
1. Analice los datos mediante "Quantitation". No será
2. En la pestaña "Other" (Otros) de la ventana
* Livak, K.J. and Schmittgen, T.D. (2001) Analysis of relative gene
expression data using real-time quantitative PCR and the 2^[–delta
delta C(T)] method. Methods 25, 402.
7-46
cv
relconc
=
cv
necesario ejecutar una curva estándar una vez se
haya realizado la validación.
"Analysis" seleccione "Delta Delta C
Manual del usuario Rotor-Gene Q MDx 09/2018
=
+
2
cv
cv
GOI
Norm
s
stddev
=
meanvalue
X
permite realizar análisis
T
2
T
Relative
T
Tabla de contenido
