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Procedimientos de funcionamiento — Software
Cuando ejecute una disociación estándar, la
temperatura aumentará a intervalos de 1 °C con una
pausa de 5 segundos antes de cada adquisición. El
Rotor-Gene Q MDx se puede configurar para realizar
disociaciones a intervalos de 0,02 °C. El tiempo de
mantenimiento mínimo entre los pasos de temperatura
varía en función del número de grados entre cada
paso.
Disociación de alta resolución
El análisis de disociación de alta resolución (HRM)
califica las muestras de ADN bicatenario según su
comportamiento de disociación (desnaturalización).
Es similar al análisis de la curva de disociación clásico,
pero proporciona mucha más información para un
rango más amplio de aplicaciones. Las muestras se
pueden diferenciar en función de la secuencia, de la
longitud, del contenido de GC o de la
complementariedad de las cadenas hasta el nivel de
cambios en un par de bases individual.
El análisis HRM solo se puede realizar en instrumentos
que tienen instalado hardware y software HRM. Los
datos se adquieren utilizando fuentes y detectores
HRM especializados. El análisis HRM también incluye la
opción de realizar una optimización de la ganancia
justo antes de iniciar la desnaturalización. Tras la HRM,
los datos se pueden analizar con un software de
análisis HRM (apartado 11).
"Optical Denature Cycling" (Ciclo de
desnaturalización óptica)
Optical Denature Cycling es una técnica apasionante
disponible en el Rotor-Gene Q MDx que realiza un
análisis de desnaturalización en tiempo real para
determinar el pico de disociación de una muestra de
referencia. Mediante esta técnica se indica la
desnaturalización PCR del producto con una precisión
mayor que mediante el ajuste de una temperatura de
desnaturalización concreta durante un tiempo de
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Manual del usuario Rotor-Gene Q MDx 09/2018
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