Cuantificación Relativa Delta Delta C - Qiagen Rotor-Gene Q MDx Manual Del Usuario

6. Los valores "Rel Min" (Mín. rel.) y "Rel Max" (Máx. rel.) se generan calculando la desviación
estándar del cociente de las desviaciones estándar del gen de interés y del gen de
normalización mediante la fórmula siguiente:
donde:
6.6.4 Cuantificación relativa delta delta C
El método delta delta C permite el análisis de la expresión génica relativa. Fue descrito por Livak
T
y Schmittgen (2001).*
Este método no necesita que se incluyan curvas estándar en cada serie. Cada muestra se normaliza
primero para la cantidad de plantilla añadida en comparación con el gen de normalización. Estos
valores normalizados se vuelven a normalizar en relación con un tratamiento de calibrador.
El calibrador puede ser, por ejemplo, un control nativo no tratado o muestras de tiempo cero.
Es fundamental que las eficiencias de amplificación del gen de interés y del gen de normalización
sean idénticas y que esto se valide conforme a las directrices de Livak y Schmittgen.
* Livak, K.J. and Schmittgen, T.D. (2001) Analysis of relative gene expression data using real-time quantitative PCR and the
2^[–delta delta C(T)] method. Methods 25, 402.
Manual del usuario de Rotor-Gene Q MDx CE 02/2022
cv cv 2 cv
= +
relconc GOI
s stddev
cv = =
meanvalue
X
T
2
Norm
105