b) Altas concentraciones de FR o complejos inmunes.
Las muestras con altas concentraciones de factor reumatoide (FR) u otros complejos inmunes
pueden mostrar una banda de precipitado en el punto de aplicación de la muestra. Reduciendo la
muestra con DTT o β-2-mercaptoetanol se puede eliminar esta reacción no específica (mezclar
190µl de suero diluido con 10µl de un 1% (w/v) de DTT en un 0,85% de solución salina, o mezclar
100µl de suero con 10µl de una dilución 1:10 de β-2-mercaptoetanol en agua. Ejecutar el IFE de
la forma usual.
β-2-mercaptoetanol).
c) Fibrinógeno.
El fibrinógeno, cuando está presente en la muestra, mostrará una especie de banda discreta en
todas las líneas delpatrón de inmunofijación. El fibrinógeno está presente en el plasma y, algunas
veces, en el suero de pacientes a los que se está aplicando una terapia anticoagulante.
3. Reacción con la cadena ligera de antisuero kappa o lambda, pero no reacción con la
cadena fuerte de antisuero IgG, IgA o IgM.
Las muestras que presentan este patrón pueden tener una gammapatía monoclonal de cadena
ligera libre o bien una proteína monoclonal IgD o IgE. En este caso, deberá repetirse la IFE,
sustituyendo el antisuero IgD e IgE por dos de los otros antisueros de cadena pesada. El fracaso
en la obtención de una reacción con antisuero IgD o IgE será un indicio de enfermedad de cadena
ligera libre.
4. Banda en la región gamma sin mostrar reactividad con antisuero IFE.
La proteína C reactiva (PCR) puede ser detectada en pacientes con una respuesta inflamatoria
12-13
aguda
. La PCR aparece en forma de banda estrecha en el extremo catódico del patrón de la
seroproteína.
evidencia de PCR. Los pacientes con una banda de PCR tendrán probablemente un elevado nivel
al realizar los análisis de PCR. A veces, puede ser vista una banda estrecha en el punto de
aplicación de la muestra, que puede estar causada por quilomicrones en el suero o proteínas
precipitadas en muestras que se han guardado congeladas.
5. No reactividad con antisuero kappa y lambda.
A veces, una muestra tendrá una reacción con un antisuero de cadena pesada, pero no una
reacción de cadena ligera, obviamente. En tal caso, será necesario descartar las siguientes
posibilidades: a) enfermedad de cadena pesada, b) concentraciones muy altas de cadenas ligeras,
conduciendo a un efecto de zona par exceso de antígeno, c) bajas concentraciones de cadenas
ligeras, d) molécula atípica de cadena ligera que no reacciona con el antisuero, e) cadenas ligeras
con determinantes de cadenas ligeras "ocultos" (como se ven a veces con IgA e IgD). Para obtener
unos resultados definitivos, el ensayo puede incluir: a) una mayor o menor dilución de la muestra
para optimizar la equivalencia anticuerpo / antígeno, b) antisuero de otros fabricantes para ayudar
en la identificación de inmunoglobulinas atípicas y c) tratar la muestra con β-2-mercaptoetanol para
"revelar" las cadenas ligeras.
CARACTERISTICAS FUNCIONALES
Se probo una serie de muestras, y al compararla con otro kit comercial disponible, ambos presentaron
resultados equivalentes.
El control de suero anormal Kemtrol de Helena Biosciences (N.º Cat. 7025) puede diluirse en una
proporción 1 en 100 y usarse como control positivo para el IFE de Orina.
NOTA: trabajar siempre en una campana de humos cuando se utilice el
Concentraciones elevadas de alfa1-antitripsina y haptoglobina son una clara
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