helena BioSciences SAS-1 Immunofix Instrucciones De Uso página 14

P P o o u u r r l l e e s s u u t t i i l l i i s s a a t t e e u u r r s s S S A A S S - - 1 1 P P l l u u s s : : Déposer 400µl de REP-prep dans le dissipateur thermique. Placer
i i i i ) )
le gel sur le dissipateur thermique, agarose vers le haut, en respectant les polarités. L'électrode
positive est positionné sur l'avant du chariot en n veillant à ce qu'il n'y ait pas de bulles d'air sous
le gel.
i i i i i i ) ) P P o o u u r r l l e e s s u u t t i i l l i i s s a a t t e e u u r r s s S S A A S S - - 3 3 : : Placer le guide d'alignement sur les picots et déposer 400µl de REP-
prep au centre de la chambre. Placer le gel dans le chambre, agarose vers le haut, en respectant
les polarités. L'électrode positive est positionné sur l'avant du chariot en n veillant à ce qu'il n'y
ait pas de bulles d'air sous le gel.
3. Sécher la surface entière du gel à l'aide d'un buvard C, jeter le buvard.
4. i i ) ) P P o o u u r r l l e e s s u u t t i i l l i i s s a a t t e e u u r r s s S S A A S S - - 1 1 : : Mettre en contact les électrodes avec les plot de fixation. S'assurer
que les électrodes soient positionnées sur les ponts d'agarose.
i i i i ) ) P P o o u u r r l l e e s s u u t t i i l l i i s s a a t t e e u u r r s s S S A A S S - - 1 1 P P l l u u s s : : (même chose que ci-dessus). Mettre le couvercle sur le gel et
les électrodes et faire pression 5 secondes pour assurer un bon contact.
i i i i i i ) ) P P o o u u r r l l e e s s u u t t i i l l i i s s a a t t e e u u r r s s S S A A S S - - 3 3 : : Mettre en contact les électrodes avec les plot de fixation
(à l'intérieur). S'assurer que les électrodes soient positionnées sur les ponts d'agarose.
5. Placer deux applicateurs en position sur le instrument. ( ( P P o o u u r r l l e e s s u u t t i i l l i i s s a a t t e e u u r r s s S S A A S S - - 3 3 : : encoches A et
10).
6. Lancer l'électrophorèse des Immunofix:
i i ) ) P P o o u u r r l l e e s s u u t t i i l l i i s s a a t t e e u u r r s s S S A A S S - - 1 1 : : 80 Volts, 20 minutes
P P o o u u r r l l e e s s u u t t i i l l i i s s a a t t e e u u r r s s S S A A S S - - 1 1 P P l l u u s s : : L'électrophorèse: 100 Volts, 18 minutes, 22°C
i i i i ) )
i i i i i i ) ) P P o o u u r r l l e e s s u u t t i i l l i i s s a a t t e e u u r r s s S S A A S S - - 3 3 : :
Etape
Chargement échant.
Application échant.
Electrophorèse
Incubation Antiséra
Buvards Peigne
Buvard D
Séchage
Utiliser la position N o 2.
*
N N O O T T E E : : Pour l'immunofixation sérique, 1 seule application est nécessaire. Pour l'immunofixation
urinaire, 10 applications sont nécessaires. Enlever les ponts d'agarose avant de procéder au
séchage.
7. A la fin de l'électrophorèse ( ( P P o o u u r r l l e e s s u u t t i i l l i i s s a a t t e e u u r r s s S S A A S S - - 1 1 P P l l u u s s : : Enlever le couvercle), retirer les
électrodes de la surface du gel. ( ( P P o o u u r r l l e e s s u u t t i i l l i i s s a a t t e e u u r r s s S S A A S S - - 3 3 : : Enlever le guide d'alignement).
Placer le masque applicateur antisérum sur le gel. NOTE: les cases antisérum doivent être
alignées sur les cases imprimées du gel en correspondance avec les échantillons déposés.
8. Déposer 2 gouttes (ou 50µL) de solution fixative (sérum) ou d'antisérum Total (urine) dans le trou
de la case SP et 2 gouttes (ou 50µL) de l'antisérum approprié dans le trou de chaque case
immunoglobuline. S'assurer que la solution fixative et les antiséra remplissent complètement les
cases.
9. Incuber le gel. ( ( P P o o u u r r l l e e s s u u t t i i l l i i s s a a t t e e u u r r s s S S A A S S - - 1 1 : : Incuber à 15...30°C).
Incubation l'étape 1: 8 minutes, 37°C (Incubation)
Incubation l'étape 2: 8 minutes, 40°C (D sécher)
Temps (mm:ss)
00:30
00:30
17:00
10:00
02:00
05:00
08:00
12
Temp (°C) Voltage
21
21
21 100
21
21
40
54
Autre
Vitesse 1
Vitesse 1*