Análisis De Datos De Real-Time Pcr - Qiagen Rotor-Gene Q MDx Manual Del Usuario

11. Edite los nombres de las muestras (opcional). Los nombres de las muestras se pueden editar
durante o después de una serie analítica.
10.8 Análisis de datos de real-time PCR
Llevar a cabo un análisis de los datos de real-time PCR antes del análisis de los datos de HRM
puede resultar útil. Los datos de real-time PCR pueden ayudar a detectar los ensayos de bajo
rendimiento. Identificar estos valores atípicos y filtrarlos para que no formen parte de los análisis
de HRM que se lleven a cabo en el futuro mejorará en gran medida la eficacia general de los
análisis de HRM, ya que analizar productos de PCR de baja calidad dará lugar a HRM de
resultados poco fiables. Recomendamos analizar los datos cuantitativos de real-time PCR de la
siguiente manera:
1. Analice los datos de real-time mediante la opción Quantitation (Cuantificación) de la ventana
Analysis (Análisis). Si hay algún valor de C
reacciones correspondientes se han amplificado demasiado tarde. Estas muestras deberán
analizarse con cautela o eliminarse del análisis al considerarse valores atípicos. La
amplificación tardía suele deberse a una cantidad de molde demasiado escasa y/o a que la
muestra esté muy degradada.
2. Evalúe el nivel de fluorescencia de punto final. Si la fluorescencia de punto final en cualquiera
de los gráficos de amplificación es baja en comparación con la mayoría de los gráficos del
conjunto de datos, omita esas muestras del análisis, aunque el valor de su C
Una fluorescencia de punto final baja indica una cantidad de colorante incorrecta, unos niveles
de componentes de reacción incorrectos (por ejemplo, los cebadores) o la acción de los
inhibidores.
Manual del usuario de Rotor-Gene Q MDx CE 02/2022
queda por encima de 30, se considerará que las
T
sea inferior a 30.
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