Qiagen Rotor-Gene Q MDx Manual Del Usuario página 97

Corrección del ruido de la pendiente
De ser posible, la fluorescencia de fondo (Fl) de una muestra debe permanecer constante antes de
la amplificación. Sin embargo, a veces la Fl muestra un aumento o un descenso gradual durante
varios ciclos debido a las sustancias químicas utilizadas. Esto produce un nivel de ruido sesgado.
La corrección del ruido de la pendiente, en lugar de un promedio, utiliza una línea de ajuste óptimo
para determinar el nivel de ruido y se normaliza con respecto a ella. Al seleccionar esta opción
haciendo clic en el botón Slope Correct (Corrección de pendiente), se pueden mejorar los datos de
las réplicas si las referencias de las muestras presentan pendientes notables. La corrección del
ruido de la pendiente mejora los datos cuando se observa que los fondos de los datos sin procesar
).
tienen una pendiente ascendente o descendente antes del punto de inicio (C
T
Cuando la pendiente no es estable o los ciclos iniciales de la referencia muestran un aumento o
una disminución significativa de la señal en comparación con el resto de la curva, la corrección
del ruido de la pendiente puede causar algunos efectos no deseados, como que las curvas del
control negativo crucen el umbral debido a la aproximación de la referencia como una línea de
ajuste óptimo y normalicen los datos sin procesar en consonancia. Por consiguiente, esta función
no siempre mejora la calidad de los datos y debe utilizarse únicamente si las curvas de datos sin
procesar presentan una pendiente estable.
Ajuste del punto de inicio
El algoritmo de ajuste del punto de inicio puede utilizarse para definir una longitud mínima de la
referencia utilizada para la normalización. Para aplicar el ajuste del punto de inicio, deben
definirse dos parámetros. Si el punto de inicio calculado mediante Dynamic tube (Tubo dinámico)
es inferior al primer parámetro, se utiliza el segundo parámetro como punto de inicio. El ajuste del
punto de inicio solo se puede utilizar junto con la normalización del Dynamic tube (Tubo dinámico).
Ignorar el primero
Es posible que la señal de fluorescencia de los primeros ciclos de una serie no represente la del
resto de la serie. Por ello, pueden lograrse mejores resultados si se ignoran los primeros ciclos.
Pueden ignorarse hasta 10 ciclos. No obstante, si los primeros ciclos son similares a los ciclos
posteriores, se obtendrán mejores resultados desmarcando "Ignore First" (Ignorar el primero),
porque el algoritmo de normalización dispondrá de más datos con los que trabajar.
Manual del usuario de Rotor-Gene Q MDx CE 02/2022 97