Guía del sistema cBot 2
4
Desnaturalice la biblioteca en la gradilla de ocho tubos del modo siguiente.
a
Añada 5 µl de biblioteca no desnaturalizada al fondo de cada pocillo.
b Añada 5 µl de NaOH 0,1 N recién diluido. Realice un pipeteo suave para mezclarlo.
c
Incube a temperatura ambiente durante 8 minutos.
d Añada 5 µl de Tris-HCl 200 mM, pH 8,0 Realice un pipeteo suave para mezclarlo.
5
Resérvelo sobre hielo durante 30 minutos hasta que esté listo para añadir la mezcla maestra ExAmp.
Preparación de la placa de reactivos de cBot
1
Invierta para mezclar.
2
Agite en un vórtice para eliminar cualquier burbuja de aire atrapada.
3
Golpee sobre una superficie dura para recoger cualquier gota de reactivo. Otra opción es pulsar en
centrifugar.
4
Déjela reposar en hielo.
Preparación de la reacción de ExAmp
Prepare la mezcla maestra de la reacción de ExAmp inmediatamente antes de su uso.
1
Invierta EPX1 y EPX2 para mezclarlos.
2
Centrifugue brevemente EPX1, EPX2 y EPX3.
3
Prepare la mezcla maestra ExAmp en el tubo de 1,5 ml del modo siguiente.
a
Añada 210 μl de EPX1.
b Añada 30 μl de EPX2. Realice un pipeteo suave para mezclarlo.
c
Añada 110 μl de EPX3. Realice un pipeteo suave para mezclarlo.
Asegúrese de que no hay burbujas en la parte inferior del tubo.
4
Añada 35 µl de la mezcla maestra en la parte inferior de cada pocillo de la gradilla de ocho tubos.
Realice un pipeteo suave para mezclarlo.
u
Cambie las puntas entre muestras.
u
5
Ponga la tapa en los tubos y centrifúguelos brevemente.
6
Colóquelos sobre hielo durante 15 minutos como máximo hasta que esté listo para cargar cBot.
Celda de flujo de alto rendimiento de HiSeq
Para preparar los reactivos, descongele y revise la placa de reactivos. La descongelación de la placa de
reactivos dura, aproximadamente, 60 minutos si se emplea para ello un baño maría a temperatura ambiente.
De manera alternativa, puede descongelar los reactivos a entre 2 °C y 8 °C durante toda la noche, sin
superar las 16 horas.
NOTA
Al agitar o invertir la placa de reactivos de cBot, ponga la mano sobre la superficie de la placa.
N.º de documento 15065681 v05 ESP N.º de material 20015507
Para uso exclusivo en investigación.
Prohibido su uso en procedimientos de diagnóstico.
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