Blotvorgang - VWR shiroGEL Vertical 20 Manual De Instrucciones

Blotvorgang:

1. Schließen Sie den Deckel und verbinden Sie mit Strom.
2. Konsultieren Sie Tabelle 6 weiter unten für Details zur empfohlenen
Stromspannung.
3. Schalten Sie die Stromversorgung ab, wenn die Ladefärbung den Grund des Gels
erreicht oder eher, wenn Ihre Proteine unter 4 Kd Größe sind.
4. Entfernen Sie das Blotmodul, indem Sie zunächst den inneren Puffer in den
Haupttank leeren. Der Puffer kann wiederverwendet werden, dies kann jedoch,
wenn fortgesetzt, die Blotqualität beeinflussen.
5. Schrauben Sie die Glasplatten los und biegen Sie die Glasplatten sanft
auseinander. Normalerweise klebt das Gel an einer der Platten und kann entfernt
werden, indem es zunächst in Puffer eingeweicht und dann vorsichtig mit einem
Spatel angehoben wird.
6. Das Gel ist nun bereit, mit Coomassie oder Silber gefärbt zu werden, oder die
Proteine im Gel können durch Elektroblotting für eine spezifische
Bandenidentifizierung und weitere Analyse auf eine Membrane transferiert
werden.
Tabelle 6.
Empfohlene Spannungen und
resultierender Strom für 1 mm dicke,
12 % Gele.
2–4 Gele
shiroGEL VERTICAL 20
35 mA (konstant); bis zu maximal
350 V
Laufzeit bis zu 5 h – keine
Kühlung; 4 h mit Kühlung
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