Gelgießen - VWR shiroGEL Vertical 20 Manual De Instrucciones

30 %
Acrylamidstammlösung
4 x auflösende TRIS-
Lösung
10 %
Ammoniumpersulfat
Gelgießen:
Für Gele mit Stapelschichten:
1. Fügen Sie den Kamm in die Glasplatten ein und markieren Sie einen Punkt auf
dem Glas 1 cm unterhalb vom Ende der Kammzähne. Dies weist darauf hin, wo
das auflösende Gel hinzugefügt werden soll.
2. Fügen Sie der Gellösung 70 µl TEMED hinzu und mischen Sie gut, vermeiden Sie
jedoch Blasenbildung.
3. Füllen Sie die Glasplatten, wobei Sie wieder darauf achten, keinerlei Luftblasen
zu generieren. Das Füllen muss rasch vonstatten gehen, ehe das Gel durch das
TEMED zu dickflüssig wird.
4. Überziehen Sie das Gel mit höchster Vorsicht mit 1 ml Isobutanol, Isorpopanol
oder destilliertem Wasser. Wenn destilliertes Wasser verwendet wird, muss
besonders darauf geachtet werden, dass dieses nicht mit der Gellösung vermischt
wird.
5 Lassen Sie das auflösende Gel polymerisieren. Dies dauert normalerweise etwa
15 Minuten, je nach Frische der verwendeten Reagenzien kann es jedoch
unterschiedlich sein. Falls die Polymerisierung sehr viel länger dauert, verwenden
Sie frischere Stammlösungen oder fügen Sie mehr APS und TEMED hinzu.
6. Bereiten Sie das Stapelgel vor, wobei Sie Tabelle 4 unten als Anleitung
verwenden. Stammlösungen werden wieder auf den Seiten 22 und 23 genannt.
Tabelle 4.
11,7 ml 17,6 ml
17,6 ml 17,6 ml
700 µl 700 µl
21
23,5 ml 28,2 ml 35,25 ml 41,1 ml
17,6 ml 17,6 ml 17,6 ml
700 µl 700 µl
17,6 ml
700 µl 700 µl