Optika B-380 Serie Manual De Instrucciones página 72

Los objetivos del microscopio diseñados para su uso con aceite de inmersión tienen una serie de ventajas sobre
los que se utilizan en seco. Los objetivos de inmersión son típicamente de mayor corrección (ya sea fluorita
o apocromática) y pueden tener aperturas numéricas de trabajo de hasta 1.40 cuando se usan con aceite de
inmersión que tenga la dispersión y viscosidad adecuadas. Estos objetivos permiten que el diafragma del con-
densador de subetapa se abra en mayor grado, extendiendo así la iluminación de la muestra y aprovechando
el aumento de la apertura numérica.
Un factor que comúnmente se pasa por alto cuando se utilizan objetivos de inmersión en aceite de mayor ap-
ertura numérica son las limitaciones impuestas al sistema por el condensador de subetapa.
En una situación en la que se utiliza un objetivo de aceite de NA = 1.40 para obtener imágenes de un espéci-
men con un condensador de subetapa de menor apertura numérica (1.0 por ejemplo), la apertura numérica
más baja del condensador prevalece sobre la del objetivo y el NA total del sistema se limita a 1.0, la apertura
numérica del condensador.
Los modernos condensadores de subetapa
suelen tener un alto grado de corrección con
valores de apertura numérica que oscilan
entre 1.0 y 1.40. Para utilizar eficazmente to-
dos los beneficios de la inmersión en aceite,
la interfaz entre la lente frontal del conden-
sador de la subetapa y la parte inferior del
portaobjetos del microscopio que contiene la
muestra también debe estar sumergida en
aceite.
En la Fig. 22 se representa esquemática-
mente un sistema ideal, en el que se ha colo-
cado aceite de inmersión en las interfaces
entre la lente frontal del objetivo y la diaposi-
tiva de la muestra, así como entre la lente
frontal del condensador y la parte inferior de
la diapositiva de la muestra.
Este sistema se ha denominado Sistema de
Inmersión Homogéneo y es la situación ideal
para conseguir la máxima apertura numérica
y resolución en un microscopio óptico.
En este caso, el índice de refracción y la
dispersión de la lente frontal del objetivo, el
aceite de inmersión, la lente frontal del condensador de subetapa y el medio de montaje son iguales o casi
iguales.
En este sistema ideal, un rayo de luz oblicuo puede pasar a través de la lente del condensador y completa-
mente a través del portaobjetos del microscopio, el aceite de inmersión y el medio de montaje sin desviarse
por refracción en interfaces de aceite de vidrio o de medio de montaje de vidrio.
Cuando se utilizan objetivos de inmersión en aceite de alto rendimiento, a veces se permite omitir el paso de
engrasar la lente superior del condensador.
Esto se debe a que el diafragma de apertura del condensador a menudo debe reducirse con objetivos menos
corregidos para eliminar los artefactos y proporcionar una imagen óptima.
La reducción en el tamaño del diafragma reduce el aumento potencial de la apertura numérica (que se con-
sigue engrasando la lente del condensador), por lo que la pérdida de calidad de imagen en estas condiciones
suele ser insignificante.
La microscopía de campo oscuro es una técnica de iluminación especializada que utiliza iluminación oblicua
para mejorar el contraste en muestras que no pueden ser bien observadas bajo condiciones normales de ilu-
minación de campo brillante.
Todos estamos bastante familiarizados con la apariencia y visibilidad de las estrellas en una noche oscura, a
pesar de sus enormes distancias de la Tierra. Las estrellas se pueden ver debido al fuerte contraste entre su
débil luz y el cielo negro.
Lente frontal Objetivo
Cubreobjetos
Muestra
Lente frontal
condensador
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Aceite de
Inmersión
Sistema de inmersión
homogéneo
Medio de
montaje
Aceite de
Inmersión
Fig. 22