Microscopia De Campo Escuro De Alta Ampliação - Optika B-380 Serie Manual De Instrucciones

11.3 Microscopia de campo escuro de alta ampliação
Para um trabalho mais preciso e fundos mais escuros, você pode escolher um condensador projetado
especificamente para o campo escuro, ou seja, para transmitir apenas raios oblíquos.
Existem várias variedades: condensadores de campo escuro "secos" com ar entre a parte superior do
condensador e a parte inferior da lâmina, e condensadores de campo escuro de imersão que requerem o uso
de uma gota de óleo por imersão (alguns são projetados para usar água) que faz contato entre a parte superior
do condensador e a parte inferior da lâmina de amostragem.
O condensador de imersão darkfield tem superfícies internas espelhadas e passa raios de grande obliquidade
e sem aberração cromática, produzindo os melhores resultados e o fundo mais preto.
Talvez o condensador de campo escuro mais amplamente usado é o parabolóide, consistindo em uma parte de
vidro sólido que foi dada uma forma muito precisa de um parabolóide. Como discutido acima, o condensador
de campo escuro seco é útil para lentes com aberturas numéricas abaixo de 0.75, enquanto os condensadores
de imersão cardióides e parabolóides (Fig. 23) podem ser usados com lentes de abertura numérica muito alta
(até 1.4).
As objectivas com uma abertura numérica superior a 1.2 requerem uma redução da sua abertura de trabalho,
uma vez que a sua abertura numérica máxima pode exceder a abertura numérica do condensador, permitindo
assim que a luz directa entre na objectiva.
Por esta razão, muitas lentes com grandes aberturas numéricas projetadas para uso com iluminação de campo
escuro e campo claro são feitas com um diafragma de íris ajustável incorporado que atua como um batente
do diafragma.
Esta redução na abertura numérica também limita o poder de resolução da objectiva e a intensidade da
luz na imagem. As objectivas especializadas concebidas exclusivamente para trabalho em campo escuro
são produzidas com uma abertura numérica máxima próxima do limite inferior da abertura numérica do
condensador de campo escuro.
Eles não têm diafragmas de íris internos, porém os diâmetros de montagem da lente são ajustados de modo
que pelo menos uma lente interna tenha o diâmetro ideal para funcionar como um limitador de abertura.
O condensador cardióide é muito sensível ao alinhamento e deve ser posicionado com cuidado para aproveitar
o cone de iluminação muito nítido, tornando-o o condensador de campo escuro mais difícil de usar.
Além disso, o condensador produz uma quantidade significativa de brilho, mesmo a partir das partículas de
pó mais pequenas, e a distância focal curta pode causar uma iluminação deficiente em objectos que excedam
alguns mícrons em tamanho ou espessura.
Ao escolher as lâminas de microscópio de campo escuro de alta ampliação, certifique-se de selecionar as
lâminas feitas de uma mistura de vidro livre de impurezas fluorescentes.
Particular atenção deve ser dada aos detalhes da lubrificação de um condensador de alta abertura na parte
inferior da lâmina de amostra. É muito difícil evitar a introdução de pequenas bolhas de ar na área entre a lente
superior do condensador e a parte inferior da lâmina de microscópio e esta técnica deve ser perfeitamente
praticada.
Bolhas de ar causarão brilho e distorção da imagem, resultando em perda de contraste e degradação geral
da imagem.
Problemas também ocorrem ao usar lâminas de microscópio que são muito grossas ou muito finas.
Muitos condensadores de campo escuro contêm a faixa de espessura da guia utilizável gravada diretamente
no suporte do condensador.
Se a lâmina for muito grossa, muitas vezes é difícil focar no condensador sem usar um óleo de imersão de
maior viscosidade. Por outro lado, lâminas muito finas tendem a quebrar a ligação de óleo entre o condensador
e a lâmina. É uma boa idéia comprar lâminas de microscópio com a espessura correta para evitar um dos
problemas mencionados acima.
Os condensadores de alta abertura, destinados a utilização a seco ou oleada, devem ser cuidadosamente
centrados no percurso óptico do microscópio para um desempenho óptimo.
Para conseguir isso, muitos condensadores de campo escuro são construídos com um pequeno círculo gravado
na superfície superior para facilitar a centralização do condensador. A centralização é realizada com uma lente
de baixa ampliação (10x-20x), observando o círculo gravado e utilizando os parafusos de centralização do
condensador para garantir que o círculo (e o condensador) estão centrados corretamente no percurso ótico.
Página 158