Procedimientos operativos
5.3.1
Prueba de funcionamiento de la estación de
vacío PyroMark Q24 MDx
Antes de utilizar la estación de vacío PyroMark Q24 MDx,
realice la prueba de funcionamiento de la forma siguiente
para comprobar si las sondas de filtro funcionan
correctamente:
1. Añada 100 µl de agua ultrapura a cada pocillo de una
2. Rellene un recipiente con 70 ml de agua ultrapura.
3. Ponga en marcha la bomba de vacío.
4. Abra el interruptor de vacío para aplicar vacío a la
5. Baje las sondas de filtro al interior del recipiente.
6. Baje las sondas de filtro al interior de la placa PCR y
7. Si los pocillos no están vacíos tras 10 s, repita el paso 1.
5.3.2
Amplificación del ADN
Amplifique el ADN que se debe analizar mediante PCR
utilizando uno de los cebadores biotinilados. Para obtener
datos de análisis válidos, consulte el Apéndice B.
5.3.3
Inmovilización del producto de la PCR sobre
microesferas
Los productos de la PCR biotinilados se inmovilizan sobre
microesferas de sefarosa recubiertas con estreptavidina
(Streptavidin Sepharose High Performance, GE Healthcare).
5-12
placa PCR de 24 pocillos.
herramienta de preparación del vacío.
Manténgalas en esta posición durante aproximadamente
20 s. Asegúrese de que el agua se transfiere al
recipiente de desechos, es decir, de que se haya
aplicado el vacío. En caso contrario, compruebe las
conexiones.
compruebe si el agua se aspira uniformemente en todos
los pocillos y si todos los pocillos están vacíos tras un
tiempo máx. de 10 s.
Si la prueba de funcionamiento falla dos veces seguidas,
sustituya las sondas de filtro (véase la sección 6.3.2).
Manual de usuario del PyroMark Q24 MDx 01/2016