helena BioSciences SAS-MX Acid HB-10 Instrucciones De Uso página 29

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A A R R T T Í Í C C U U L L O O S S N N E E C C E E S S A A R R I I O O S S N N O O S S U U M M I I N N I I S S T T R R A A D D O O S S
no de catálogo 4063 Cámara SAS-MX
no de catálogo 1525 Fuente de alimentación EPS600
no de catálogo 5328 AA
no de catálogo 5329 ASA
no de catálogo 5330 AFSA
no de catálogo 5331 AFSC Hemocontrol
Horno de secado con ventilación forzada con capacidad de 60...70°C
Solución decolorante/fijadora: Mezclar 200ml de metanol, 100ml de agua purificada y 100ml de ácido
acético cristalizado. Guardar en un frasco herméticamente cerrado.
Solución Salina (0,85% NaCl)
Agua purificada.
R R E E C C O O G G I I D D A A Y Y P P R R E E P P A A R R A A C C I I Ó Ó N N D D E E M M U U E E S S T T R R A A S S
La muestra consistirá en EDTA o heparina anticoagulada recién obtenidas. Las muestras se pueden
guardar refrigeradas a una temperatura entre 2...6°C hasta una semana.
resultados óptimos, se emplearán células rojas lavadas con la solución salina para preparar lisatos.
Así se eliminan posibles interferencias de proteínas de plasma.
a) Mezclar 200µL of sangre bien mezclada con 1000µL de solución salina.
b) Centrifugar para sedimentar las células rojas.
c) Extraer 1000µl del supernatátil y desecharlo.
d) Añadir otros 1000µl de solución NaCl y mezclar bien.
e) Repetir los pasos b - d por dos veces.
f)
Tras el centrifugado final, extraer 1000µl del supernatátil y tratar el resto de la muestra como
sangre entera, o retirar todo el supernatátil y tratar el resto de la muestra como células
centrifugadas lavadas.
Diluir la muestra / controles de cada paciente en una concentración de hemoglobina de 0,5 -1,5 g/dL
con el agente lisinador de hemoglobina.
P P R R O O C C E E D D I I M M I I E E N N T T O O P P A A S S O O A A P P A A S S O O
1. Sacar el gel del envase y colocarlo sobre una toallita de papel. Secar la superficie del gel con un
secante C y luego desechar el secante.
2. Alinear la plantilla de aplicación de la muestra con las flechas existentes en el borde del gel. Aplicar
un secante A sobre la parte superior de la plantilla y frotar con un dedo a lo largo de las rejillas para
asegurar un buen contacto. Retirar el secante A y conservarlo para utilizarlo luego en el paso 5.
3. Aplicar 3µl de muestra en cada ranura y dejar que absorba durante 5 minutos.
4. Mientras la muestra es absorbida, verter aproximadamente 30ml del concentrado tampón en cada
hueco interior de la cámara SAS-MX.
5. Finalizada la absorción, secar la plantilla con secante A conservado del paso 2 y retirar el secante
y la plantilla.
6. Colocar el gel en la cámara con la agarosa hacia abajo, alineando los lados positivo (+) y negativo
(-) con las posiciones correspondientes en la cámara.
7. Realizar la electroforesis del gel: 50 voltios, 30 minutos
8. Finalizada la electroforesis, sumergir el gel en solución decolorante/fijadora durante 5 minutos.
9. Sumergir el gel seco en la solución colorante durante 15 minutos.
Hemocontrol
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Hemocontrol
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HB-10 ÁCIDA SAS-MX
Para conseguir unos
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