Tabla de contenido
8.3
Hibridación y lavado
8.3.1
Preparación y configuración
Comience por los preparativos necesarios para la hibridación y los pasos de lavado al menos
30 minutos antes de iniciar el procedimiento de hibridación para garantizar que todos los
componentes necesarios están equilibrados a temperatura ambiente.
Para disolver los precipitados potenciales en los tampones de lavado e hibridación, expóngalos
a temperatura ambiente durante 30 minutos y mézclelos bien antes de usarlos.
El almacenamiento del equipo de ensayo PapilloCheck
dar lugar a precipitados de dodecilsulfato en el tampón de hibridación y el tampón B. Permita que
las soluciones se equilibren a temperatura ambiente y, a continuación, mezcle el contenido del tubo
mediante un Vortex o agite el frasco hasta que el precipitado se disuelva.
Prepare la cámara de hibridación oCheck
la cámara de hibridación y cierre la tapa para crear una atmósfera saturada de humedad.
Para evitar la evaporación del pequeño volumen de mezcla de hibridación utilizada en el microchip, es
necesario realizar la hibridación en una atmósfera saturada de humedad. Greiner Bio-One suministra
una cámara de hibridación especializada para el análisis PapilloCheck
Incube la cantidad necesaria de microchips PapilloCheck
a temperatura ambiente durante al menos 10 minutos.
El soporte de portaobjetos magnético de la cámara de hibridación contiene un imán solamente en uno de sus
!
extremos. Si se van a hibridar en paralelo menos de cuatro microchips PapilloCheck
de portaobjetos con microchips PapilloCheck
microchips PapilloCheck
Prepare las soluciones de lavado I, II y III según las siguientes instrucciones.
Preparación de las soluciones de lavado I, II y III:
Prepare la mezcla de solución de lavado para las soluciones de lavado I, II y III adecuadas para
el número de microchips PapilloCheck
Divida tres alícuotas con el mismo volumen de mezcla de solución de lavado en tres recipientes
de lavado oCheck
®
lavado oCheck
contiene una escala grabada, que indica la cantidad correcta de solución de lavado
®
necesaria para un máximo de 4 microchips. Use esta escala para comprobar la cantidad de tampón.
Precaliente la solución de lavado II a 50 °C en un baño María con temperatura controlada durante
al menos 20 minutos antes de usarla. Asegúrese de que el nivel de llenado del baño María sea
equivalente al de la solución de lavado II.
Tabla 5: Preparación de la mezcla de solución de lavado
Componentes
Agua depurada
Tampón A PapilloCheck
®
Tampón B PapilloCheck
®
Volumen total
Manual de instrucciones de PapilloCheck
Revisión: BQ-708-00 / Octubre de 2017
: coloque una nueva toallita de papel humedecida en
®
empezando desde el lado opuesto al imán. De lo contrario, los
®
no quedarán sumergidos durante el procedimiento de lavado.
®
que se vayan a analizar, como se muestra en la Tabla 5.
®
diferentes y etiquételas como solución de lavado I, II y III. Cada recipiente de
Número de microchips PapilloCheck
1
140 ml
280 ml
14 ml
28 ml
1,75 ml
3,5 ml
155,75 ml
311,50 ml
y PapilloCheck
high-risk
®
®
a una temperatura de entre 4 y 8 °C puede
®
en la cámara de hibridación preparada
®
®
2
3
420 ml
42 ml
5,25 ml
467,25 ml
(consulte el capítulo 2).
®
, procure llenar el soporte
®
4
560 ml
56 ml
7 ml
623 ml
27
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