PROCEDIMIENTO PASO A PASO
1. Programar los siguientes parámetros en el instrumento:
Paso
Electroforesis
Cargar muestra
Aplicar muestra
Electroforesis
Aplicar antisuero
Insertar peine
Secante D
Secar
*
Utilizar la posición 2 para SPIFE 3000 / SAS-3.
NOTA 1: Para la inmunofijación del suero, se necesita 1 aplicación de la muestra.
inmunofijación de la orina, son necesarias 10 aplicaciones de la muestra.
N N O O T T A A 2 2 : : Pueden estudiarse simultáneamente muestras de orina y suero en un mismo gel. Sin
embargo, cada fila individual debe contener exclusivamente un tipo de muestra (p. ej., las filas 2 y 8 =
orina; la fila 14 = suero). Si se va a usar una combinación de suero y orina en el mismo gel, compruebe
que las hojas para las muestras de orina van hacia el SAS-3 en las primeras 9 cargas/aplicaciones. Añada
la hoja del aplicador para la muestra de suero de la aplicación de carga final (10ª), exclusivamente.
Colorante
Solución de lavado 00:03
Solución de lavado 10:00
Colorar
Decolorar
Decolorar
Secar
2. Colocar en el instrumento el número correcto de unidades de aplicadores:
Número de muestras
9
6
3
3. i) Solo para SPIFE Combo: Introducir con una pipeta 17µl de la muestra en cada cavidad de la
base para muestras. Proteger las muestras de la evaporación.
ii) Solo para SPIFE 2000 / 3000 / SAS-3: Introducir con una pipeta 35µl de la muestra en vasos
de recogida de muestras desechables. Proteger las muestras de la evaporación.
4. Sacar el gel del envase y desechar la lámina sobrepuesta.
5. Administrar 2ml de REP Prep al lado izquierdo de la cámara y colocar cuidadosamente el gel en la
cámara, alineando los orificios en la ligazón del gel con las espigas de la cámara y evitando la
formación de burbujas debajo del gel. Conectar los electrodos a la parte externa de los bordes,
de forma que estén en contacto con los bloques de gel.
6. Secar la superficie del gel con un secante, luego desechar el secante.
Tiempo (mm:ss.) Temperatura (°C) Voltaje Otros
00:30
00:30
06:30
10:00
02:00
05:00
08:00
04:00
02:00
02:00
12:00
SPIFE Combo
21
21
21
21
21
40
54
63
Posición del aplicador
4, 11, 18
4, 11
4
34
Velocidad 1
Velocidad 1*
650
Recirculación activada
Recirculación activada
Recirculación activada
Recirculación activada
Recirculación activada
SPIFE 2000/3000 y SAS-3
2, 8, 14
2, 8
2
Para la