helena BioSciences SAS-3 Immunofix Instrucciones De Uso página 13

NOTE: Pour l'immunofixation sérique, 1 seule application est nécessaire. Pour l'immunofixation
urinaire, 10 applications sont nécessaires.
REMARQUE 2: Il est possible d'utiliser simultanément sur le même gel des échantillons d'urine et
de sérum. Cependant, chaque rang ne doit contenir qu'un seul type d'échantillon (par ex. rangs 2
et 8 = urine, rang 14 = sérum). En cas d'utilisation d'une combinaison d'échantillons d'urine et de
sérum sur le même gel, s'assurer que les applicateurs pour échantillons d'urine sont placés dans le
SAS-3 pour les 9 premiers chargements et dépôts. Ajouter un applicateur pour échantillons de
sérum pour le dernier (10e) chargement et dépôt.
Etape
Module de coloration
Solution de lavage
Solution de lavage
Colorant
Décolorant
Décolorant
Séchage
2. Placer le nombre correct d'applicateurs en position dans l'instrument:
Nombre d'échantillons
9
6
3
3. i) Pour les utilisateurs SPIFE Combo: Déposer 17µl d'échantillon dans les puits de l'embase.
Couvrir les échantillons afin d'éviter l'évaporation.
ii) Pour les utilisateurs SPIFE 2000 / 3000 / SAS-3: Déposer 35µl d'échantillon dans les
cuvettes jetables. Couvrir les échantillons afin d'éviter l'évaporation.
4. Sortir le gel de son emballage et retirer le film plastique.
5. Déposer 2ml de REP Prep sur la partie gauche de la chambre de migration et délicatement placer
le gel dans la chambre. Aligner les trous de la plaque de gel avec les picots de fixation de la
chambre en prenant soin de ne pas emprisonner de bulles sous le gel. Fixer les électrodes sur
l'extérieur des plots que sorte qu'elles soient en contact avec les ponts d'agarose.
6. Sécher la surface entière du gel à l'aide d'un buvard C, jeter ensuite le buvard.
7. Sélectionner le programme IFE et suivant les instructions, appliquer les échantillons et lancer
l'électrophorèse.
8. A la fin de l'électrophorèse, retirer les électrodes et retirer les ponts d'agarose en utilisant la
raclette. Placer le masque applicateur antisérum sur le gel. NOTE: les cases antisérum doivent
être alignées sur les cases imprimées du gel en correspondance avec les échantillons déposés.
9. Déposer 2 gouttes (ou 60µL) de solution fixative (sérum) ou d'antisérum Total (urine) dans le trou
supérieur de la case SP et 2 gouttes (ou 60µL) de l'antisérum approprié dans le trou supérieur de
chaque case immunoglobuline. S'assurer que la solution fixative et les antiséra remplissent
complètement les cases.
10. Incuber le gel.
11. A la fin du temps d'incubation, déposer 1 buvard peigne dans les trous supérieurs du masque
Temps (mm:ss)
00:03
10:00
04:00
02:00
02:00
12:00
SPIFE Combo
4, 11, 18
4, 11
4
11
Temp (°C)
Recirculation Oui
Recirculation Oui
Recirculation Oui
Recirculation Oui
Recirculation Oui
63
Position des applicateurs
SPIFE 2000/3000 et SAS-3
SAS-3 IMMUNOFIX
Autre
2, 8, 14
2, 8
2
Français