Tabla de contenido
Nota: Debido a que este es
un método de tinción de alta
sensibilidad, es importante
usar guantes al manipular geles
y utilizar recipientes limpios.
Para reducir el fondo, use
sólo reactivos de alta pureza y
eliminar el tampón de los geles
durante la fijación y los pasos
decolorar.
Coomassie Protocolo
A. Tinte gel en solución de Coomassie mancha a
temperatura ambiente durante la noche. Los geles
también se pueden teñir rápidamente mediante su
puesta a 55 °C en un baño de agua con agitación
durante 30-45 minutos.
B. Coloque gel en solución Destain I a temperatura
ambiente. Cambie la solución destain cuando llega
a un color azul profundo hasta que los resultados
de fondo claro.
C. Guarde el gel en Destain solución II.
Para un método más sensible, el protocolo de tinción
de plata se recomienda.
Protocolo de tinción de plata
(Adaptado de Morrissey, 1981)
Agitación suave, se recomienda lo largo de este
procedimiento.
A. Tinción del gel como de costumbre con Coomassie
Blue. Destain el gel con varios cambios de Destain
solución II.
-O-
Fijar el gel en 100 ml de solución Destain I durante
30 minutos, luego colocar el gel en 100-200 ml de
solución Destain II durante 30 minutos. Deseche la
solución, rellenar, y se lava con solución II Destain un
segundo de 30 minutos.
B. Transferir el gel a 100 ml de solución de reticu-
lación durante 30 minutos.
C. Se decanta el glutaraldehído y enjuagar el gel con
varios cambios de agua desionizada durante un
período de dos horas.
-O-
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