Tabla de contenido
problema
posible causa
Resolución de la
Condiciones de
banda pobre
funcionamiento
Reactivo de la
calidad
Pobre de apilamiento Utilice solamente los geles que estaban recién preparado.
Polimerización de gel
incompleta
Preparación de la
muestra
•
p28
remedio
Comienza electroforesis tan pronto como la muestra se carga
para evitar las especies de bajo peso molecular a partir de
la difusión.
Llevar a cabo la separación en una posición más baja de
corriente o tensión para reducir el calentamiento Joule.
Use sólo los reactivos de la más alta calidad.
Añadir un gel de apilamiento o aumentar la altura del gel
de apilamiento. Preparar la superficie Resolviendo-gel por
primera vez aclarado con monómero de apilamiento de
gel antes de verter el gel de apilamiento para asegurar la
continuidad entre los geles.
Compruebe los valores de pH de las resolución de
apilamiento y-gel soluciones. No valorar en retroceso
tampones.
Permitir gel para polimerizar completamente.
Almacenar la muestra en hielo antes de que sea
desnaturalizada.
Dializar o desalar la muestra.
Muestras de calor en tampón de muestra SDS para no más
de 1-2 minutos a 100 °C para mejorar la disociación de las
subunidades. Almacenar en hielo después del calentamiento.
Ajustar el volumen de muestra o de la concentración.
Añadir más mercaptoetanol o ditiotreitol, revisar el
tratamiento de la muestra.
Añadir inhibidores de proteasa tales como PMSF si es
necesario para evitar la degradación proteolítica de la
muestra.
Aumentar glicerol o sacarosa para aumentar la densidad de
la muestra.
Almacene las muestras que se congeló en alícuotas para
evitar repetidas congelación-descongelación. Almacenar a
-40 a -80 °C.
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