Tabla de contenido
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6. La resolución de gel de superposición
(0,375 M TrisCl, 0,1% SDS, pH 8,8, 100 ml)
1,5 M Tris-Cl, pH 8,8 (Solución #2) 0,375 M 25,0 ml
10% SDS (Solución #4)
H
O desionizada
2
Almacena hasta 3 meses a 4 °C en la oscuridad.
-o-
El agua saturada de n-butanol
Agitar n-butanol y desionizada H2O en un embudo de
separación. Retire la acuosa (inferior) de fase. Repita
este procedimiento varias veces. Utilice la fase supe-
rior.
-o-
Si una superposición interfiere con el protocolo
preferido, aislar el gel a partir del oxígeno atmosférico
mediante la colocación de un peine preparativa o gel
de resolución anterior en el gel.
7. Ejemplo 2X tampón tratamiento
(0,125 M TrisCl, 4% SDS, 20% glicerol,
0,2 mM DTT*, pH 6,8, 10 ml)
0,5 M Tris Cl, pH 6,8 (Solución #3)
10% SDS, 0,35 M (Solución #4)
Glicerol (FW 92,09)
Dithiothreitol (DTT) (FW 154,2)
Azul de bromofenol (FW 691,9)
H
O desionizada
2
o 2-mercaptoethanol (FW 78,13)
*
Dividir en partes alícuotas de 1,0 ml y se almacena a -40 °C
a -80 °C durante un máximo de 6 meses.
-o-
Ejemplo 6X tampón tratamiento
(0,35 M TrisCl, 10% SDS, 30% glicerol, 9,3% DTT,
pH 6,8, ~10 ml)
0,5 M TrisCl, pH 6,8 (Solución #3)
SDS (FW 288,4)
Glicerol (FW 92,09)
DTT (FW 154,2)
Azul de bromofenol (FW 691,9)
Dividir en partes alícuotas de 1,0 ml y se almacena a -70 °C.
3,5 mm
1,0 ml
a 100,0 ml
0,125 M
2,5 ml
0,14 M
4,0 ml
20% v/v
2,0 ml
0,2 mM
0,31 g
0,3 mM
2,0 mg
a 10,0 ml
2% v/v
0,2 ml
0,35 M
7,0 ml
0,35 M
1,0 g
30% v/v
3,0 ml
0,6 M
0,93 g
0,175 mm
1,2 mg
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