Tabla de contenido
Indicador
Supresor
Ilustración 2. Principio de reacción. El ARN total se transcribe de forma inversa y el ADNc
generado se amplifica mediante PCR utilizando un par de primers específicos y una sonda
interna específica con doble fluoróforo (FAM
cada paso de hibridación de la PCR. Cuando la Taq se extiende desde la unión con el primer
hasta el amplicón, desplaza el extremo 5' de la sonda, la cual se degrada a continuación por
la actividad de la exonucleasa 5'→3' de la ADN polimerasa Taq. La escisión prosigue hasta
que la sonda restante se funde con el amplicón. Este proceso libera el fluoróforo y el supresor
en la solución, separándolos físicamente y causando un aumento de la fluorescencia de FAM
y un descenso de la fluorescencia de BHQ-1.
Manual del kit ipsogen BCR-ABL1 Mbcr RGQ RT-PCR 12/2014
Sonda específica
Producto de la PCR
–BHQ
-1). La sonda se une al amplicón durante
™
®
Hibridación
Hibridación de primers
y sonda
Polimerización
Desplazamiento de
la hebra
Escisión
Conlleva la liberación del
fluoróforo supresor y la emisión
de la señal de fluorescencia
del indicador
Polimerización completada
Producto de la PCR comple-
tado y acumulación de la señal
de fluorescencia en cada ciclo
Primers directo
e inverso
Polimerasa Taq
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