Resultados; Principio De Análisis De Los Datos - Qiagen ipsogen BCR-ABL1 Mbcr RGQ RT-PCR Manual

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Resultados

Principio de análisis de los datos
En el caso de utilizar la tecnología TaqMan
PCR para detectar una señal por encima del umbral se denomina ciclo umbral
(C
) y es directamente proporcional a la cantidad de objetivo presente al
T
principio de la reacción.
Si se utilizan estándares con un número conocido de moléculas, es posible
establecer una curva estándar y determinar la cantidad precisa de objetivo
presente en la muestra de ensayo. Las curvas estándar se basan en plásmidos.
A fin de garantizar la exactitud de las curvas estándar, se utilizan 4 diluciones
estándar para ABL1 y 5 diluciones estándar para Mbcr. El kit incluye, además,
calibrador IS que permite la conversión de los resultados a la escala inter-
nacional. Las ilustraciones 4 y 5 muestran ejemplos de curvas de amplificación
de TaqMan similares a las obtenidas a partir de estándares, el calibrador
IS-MMR, el control positivo alto para ARN y el control positivo bajo para ARN
con el kit ipsogen BCR-ABL1 Mbcr RGQ RT-PCR.
Fluor. norm.
0,60
0,55
0,50
0,45
0,40
Calibrador IS-MMR
0,35
Control positivo
0,30
0,25
0,20
0,15
0,10
0,05
Umbral
0,00
Ilustración 4. Detección de ABL1 con controles y estándares SP3, SP4, SP5 y SP6.
10
, 10
, 10
y 10
copias/reacción.
3
4
5
6
34
Control positivo
bajo
alto
Ciclo
Manual del kit ipsogen BCR-ABL1 Mbcr RGQ RT-PCR 12/2014
®
, el número necesario de ciclos de
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