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Nota: En caso de que la lisis manual (pasos 1-5) se realice fuera del instrumento, se
pueden automatizar los siguientes pasos (6-14): "Protocolo de lisis manual" en el
QIAcube o en el QIAcube Connect MDx, o bien "Muestras de plasma de volúmenes
grandes, protocolo de lisis manual" en el QIAcube.
6. Añada 250 μl de etanol (96-100 %) a la muestra, cierre la tapa y mezcle mediante
agitación vorticial de pulsos durante un mínimo de 15 segundos. Incube el lisado con el
etanol durante 5 minutos ± 30 segundos a temperatura ambiente (15-25 °C).
Si la temperatura ambiente es superior a 25 °C, se recomienda enfriar el etanol con
hielo antes de añadirlo al lisado.
7. Centrifugue brevemente el tubo para eliminar las gotas del interior de la tapa.
8. Aplique con cuidado todo el lisado obtenido en el paso 7 sobre la columna QIAamp
MinElute procurando no humedecer el borde. Cierre la tapa y centrifugue a
aproximadamente 6000 × g durante más de 1 minuto. Disponga la columna QIAamp
MinElute en un tubo de lavado (WT) limpio de 2 ml y deseche el tubo de lavado que
contiene el filtrado.
Si el lisado todavía no ha atravesado completamente la columna tras el centrifugado,
repita el centrifugado a una velocidad mayor hasta que la columna QIAamp MinElute
esté vacía.
9. Abra con cuidado la columna QIAamp MinElute y añada 500 µl de Buffer AW1 sin
mojar el borde. Cierre la tapa y centrifugue a aproximadamente 6000 × g durante al
menos 1 minuto. Disponga la columna QIAamp MinElute en un tubo de lavado (WT)
limpio de 2 ml y deseche el tubo de lavado que contiene el filtrado.
10. Abra con cuidado la columna QIAamp MinElute y añada 500 µl de Buffer AW2 sin
mojar el borde. Cierre la tapa y centrifugue a aproximadamente 6000 × g durante al
menos 1 minuto. Disponga la columna QIAamp MinElute en un tubo de lavado limpio
de 2 ml y deseche el tubo de lavado que contiene el filtrado.
11. Abra con cuidado la columna QIAamp MinElute y añada 500 µl de etanol (96-100 %)
sin mojar el borde. Cierre la tapa y centrifugue a aproximadamente 6000 × g durante
al menos 1 minuto. Deseche el tubo de lavado que contiene el filtrado.
Manual de instrucciones de uso de QIAamp DSP Virus Spin Kit
01/2021
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