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Leica Microsystems Heidelberg GmbH
=
I
V
0
0
(
)
=
×
α
×
+
I
T
I
V
1
n
0
1
(
)
=
×
α
×
+
I
T
I
V
n
2
1
2
L
(
)
=
×
α
×
+
I
T
I
V
−1
n
n
n
donde In es el píxel de la proyección, Tn = 1 - (Vn / Vmax) es la normalización, α el factor de
transparencia variable, In-1 el valor del voxel calculado previamente y Vn el voxel analizado en la
actualidad.
El cálculo de la proyección comienza en la imagen más baja del lote y finaliza con la imagen superior.
La graduación de los valores de intensidad se compone de dos factores.
El primero, Tn, es el resultado de la relación entre cada valor de intensidad medido y la máxima
intensidad posible (normalización). Este factor garantiza que no se sobrepasa la zona de valores
grises de una imagen, por ejemplo, entre 0 y 255 con 8 bits.
El segundo factor de transparencia (ajustable por el usuario) α (0 < α < 1) determina la graduación
del valor de intensidad medido previamente. Cuanto más alto es el factor de transparencia, con
mayor fuerza influyen los valores de intensidad de los niveles inferiores del lote de imágenes en la
proyección.
Proyección SFP (proceso de fluorescencia simulado), simulación matemática de un proceso
de fluorescencia
Con este tipo de proyección se simula mediante operaciones de cálculo el proceso utilizado en
microscopía de fluorescencia de absorción de luz de láser y emisión de luz fluorescente en un
preparado. Este proceso consta de dos pasos de cálculo.
En el primero, se simula el rayo láser (1) cada vez más débil que atraviesa la muestra. Se parte de
una fuente luminosa lateral que cae sobre el voxel del lote de imágenes. El debilitamiento del haz al
atravesar el lote de imágenes se contempla mediante la fórmula siguiente:
V
n
=
−
⋅ α
I
I
(
1
)
+
n
n
1
V
max
donde In+1 es la intensidad remanente de la luz tras la absorción del voxel número n, In es la
intensidad de la luz en el voxel número n, α el coeficiente de absorción del haz de láser en la
muestra, Vn la intensidad en el voxel y Vmax la intensidad máxima de voxel. El cociente Vn / Vmax
corresponde a la normalización.
Para cada voxel se calcula la intensidad de iluminación VIn = In x Vn a partir de las intensidades
recogidas In y se almacena de forma temporal en una tabla (In = intensidad de la luz que entra en el
voxel n, Vn = intensidad del voxel n). El cálculo se realiza en un solo paso para todo el lote de
Manual del usuario de Leica TCS SP2 español
Art. n.º: 159330056 / Vers.: 31102002
n
Funciones del software LCS:
Descripción de cada función
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